Anticorps monoclonal de lapin anti-PFKFB3 pour WB, IHC-P, ELISA - Q16875

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PFKFB3

• PFKFB3 (6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 3) est une enzyme bifonctionnelle qui catalyse à la fois la synthèse et la dégradation du fructose-2,6-bisphosphate, un puissant régulateur allostérique de la glycolyse.
• Elle est également connue sous les noms d’antigène de carcinome rénal NY-REN-56 et de phosphofructokinase-2 inductible (iPFK-2).
• PFKFB3 appartient à la famille des phosphofructokinases-2/fructose-2,6-bisphosphatases, qui comprend quatre isoenzymes (PFKFB1-4) présentant une expression spécifique aux tissus ; PFKFB3 est exprimée de manière ubiquitaire.
• En contrôlant la concentration intracellulaire de fructose-2,6-bisphosphate, PFKFB3 joue un rôle essentiel dans la régulation du flux glycolytique et du métabolisme énergétique.
• Cette enzyme est soumise à un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes (mot-clé UniProt : épissage alternatif).
• PFKFB3 possède à la fois des activités kinase (transférase) et bisphosphatase (hydrolase), ce qui la classe comme une enzyme multifonctionnelle.
• La régulation s’effectue par phosphorylation (mot-clé UniProt : phosphoprotéine) ; les mots-clés supplémentaires incluent structure 3D, liaison à l’ATP, liaison aux nucléotides et protéome de référence.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Les acides aminés 400 à 500 de l’immunogène se trouvent dans la région C-terminale, qui peut être conservée entre les espèces, ce qui étaye la réactivité croisée rapportée avec les protéines humaines et murines.
• Pour le WB, prévoir une bande spécifique à environ 60 kDa ; valider dans des systèmes d’échantillons pertinents (humains et murins) en utilisant des contrôles de charge appropriés.
• Pour l’IHC-P, une récupération antigénique peut être nécessaire ; envisager une récupération induite par la chaleur dans un tampon citrate (pH 6,0) ou un tampon EDTA (pH 9,0).
• En tant qu’anticorps monoclonal, il offre une grande spécificité ; inclure systématiquement des contrôles négatifs et positifs dans les expériences.
• Les applications ELISA nécessitent une optimisation de la concentration de l’antigène de revêtement et de la dilution de l’anticorps afin d’obtenir un rapport signal/bruit optimal.

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