Anticorps polyclonal PERK de lapin pour IF/CCI, ELISA - Q9NZJ5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PERK

• Identité protéique et isoformes : PERK (EIF2AK3) est également connue sous le nom de kinase du réticulum endoplasmique de type PRKR, kinase pancréatique de l'eIF2-alpha et tyrosine kinase protéique EIF2AK3. Elle appartient à la famille des kinases d'eIF2α et est le capteur principal du stress du réticulum endoplasmique.
• Kinase de la réponse aux protéines dépliées (UPR) : PERK est une kinase détectant le stress métabolique qui phosphoryle la sous-unité α du facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2 (EIF2S1/eIF-2α) en réponse aux protéines dépliées et à divers stress cellulaires.
  Références associées :
  PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• Activation par les protéines mal repliées : Elle reconnaît et lie spécifiquement les protéines mal repliées dans le réticulum endoplasmique, ce qui déclenche son autophosphorylation et son activation, initiant la réponse de stress intégrée (ISR).
  Références associées :
  PMID:10677345, PMID:27917829, PMID:31023583
• Reprogrammation de la traduction : La phosphorylation d'eIF2α atténue la synthèse protéique globale dépendante de la coiffe, tout en favorisant sélectivement la traduction des ARNm répondant au stress, notamment les facteurs de transcription ATF4 et QRICH1, ce qui permet de reprogrammer l'expression génique.
  Références associées :
  PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Régulation mitochondriale : La signalisation UPR médiée par PERK augmente la phosphorylation oxydative mitochondriale en régulant à la hausse l'expression de COX7A2L via ATF4. Au niveau des sites de contact entre mitochondries et réticulum endoplasmique, ATAD3A inhibe PERK pour protéger les mitochondries contre une activation excessive de l'UPR.
  Références associées :
  PMID:31023583, PMID:39116259
• Activation de NRF2 : En plus d'eIF2α, PERK phosphoryle NFE2L2/NRF2, provoquant sa dissociation de KEAP1 et sa translocation nucléaire ultérieure, qui active les gènes antioxydants et de détoxification (par similarité).
• Localisation subcellulaire : Membrane du réticulum endoplasmique – PERK est une protéine transmembranaire résidant majoritairement dans le réticulum endoplasmique.
• Distribution tissulaire : Exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux particulièrement élevés dans les tissus sécrétoires, ce qui est cohérent avec son rôle de surveillance de l'environnement de repliement du réticulum endoplasmique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à une région située entre les acides aminés 50 et 600 de la PERK humaine. Pour l'IF/CCI, il est recommandé d'utiliser des conditions standard de perméabilisation et de fixation adaptées aux protéines résidentes du réticulum endoplasmique. Réalisez une titration de l'anticorps primaire pour optimiser le rapport signal/bruit.
• Lors de l'utilisation pour ELISA, envisagez d'inclure un peptide bloquant ou une protéine PERK recombinante comme contrôle de spécificité. Validez la réactivité croisée avec des échantillons de souris en utilisant des lysats de tissus à forte activité sécrétoire.
• PERK étant une kinase transmembranaire du réticulum endoplasmique, envisagez d'utiliser des détergents doux pendant l'extraction des protéines pour préserver les épitopes conformationnels si l'anticorps est utilisé dans d'autres immunoessais en dehors des applications validées.

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