Anticorps monoclonal PerCP/Cyanine5.5 de lapin anti-CD4 de souris pour cytométrie en flux - P06332

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD4

• La cible est la protéine CD4 de souris (glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD4), également connue sous le nom de L3T4 ou Ly-4. Deux isoforms issus d'épissage alternatif ont été décrits, l'isoforme 1 étant la séquence canonique (UniProt P06332).
• CD4 est une glycoprotéine membranaire intégrale qui agit comme corécepteur des molécules du CMH de classe II sur les lymphocytes T, reconnaissant les peptides dérivés de protéines extracellulaires, et joue donc un rôle essentiel dans l'immunité adaptative.
• Lors de la liaison avec les complexes CMH de classe II:peptide sur les cellules présentatrices d'antigène, CD4 interagit simultanément avec le récepteur des lymphocytes T (TCR) et recrute la kinase Src LCK sur le complexe TCR-CD3, initiant des cascades de signalisation qui favorisent l'activation des lymphocytes T auxiliaires, la production de cytokines et la prolifération.
• Au-delà de la signalisation dépendante du TCR, CD4 contribue également à des fonctions indépendantes du TCR/LCK dans les macrophages et les cellules NK, influençant la différenciation, l'activation, l'expression de cytokines et la migration cellulaire.
• CD4 est essentiel pour le développement des lymphocytes T auxiliaires dans le thymus et est capable de déclencher la différenciation des monocytes en macrophages matures fonctionnels.
• La protéine est majoritairement exprimée sur la membrane cellulaire des lymphocytes T auxiliaires, qui sont spécialisés dans l'activation des lymphocytes T cytotoxiques, la régulation des lymphocytes B et l'activation des phagocytes. On la retrouve également dans d'autres cellules immunitaires comme les macrophages, les cellules dendritiques et les cellules NK.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la glycosylation N-liée, la palmitoylation, la phosphorylation et la présence de ponts disulfures, qui sont importants pour sa stabilité structurelle et sa fonction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps couvre les acides aminés 27 à 394 de la protéine CD4 de souris (NP_038516.1), ce qui inclut l'ensemble du domaine extracellulaire. Cette conception favorise la reconnaissance de la CD4 native exprimée à la surface cellulaire.
• Cet anticorps est validé pour la cytométrie en flux (CF) et fourni sous forme de conjugué PerCP/Cyanine5.5, permettant la détection directe du CD4 murin sur des cellules vivantes sans avoir besoin d'un anticorps secondaire.
• Lors de la mise en place d'expériences de cytométrie en flux, pensez à titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre type de cellule et votre instrument spécifiques. Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des colorants de viabilité pour garantir un gate précis.
• CD4 étant exprimée sur les lymphocytes T auxiliaires et d'autres populations immunitaires, vérifiez le profil de coloration dans les échantillons de tissus ou de cellules de souris concernés (par exemple : splénocytes, thymocytes, PBMC) et envisagez une co-coloration avec CD3 et CD8 pour discriminer les sous-ensembles de lymphocytes T.

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