Anticorps monoclonal de lapin anti-PD-1/CD279 Humain/Singe conjugué au PerCP/Cyanine5.5 pour la cytométrie en flux - Q15116

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PD-1

• La protéine 1 de mort cellulaire programmée (PD-1, CD279) est un récepteur inhibiteur exprimé sur les lymphocytes T activés par l'antigène qui joue un rôle crucial dans l'induction et le maintien de la tolérance immunitaire au soi. Références associées : PMID:21276005 PMID:31754127 PMID:32184441

• PD-1 transmet des signaux inhibiteurs après liaison à ses ligands PD-L1 (CD274) et PD-L2 (CD273), conduisant à l'atténuation de la signalisation du récepteur des lymphocytes T (TCR) et à la suppression de l'activation des lymphocytes T. Références associées : PMID:21276005 PMID:26602187

• Suite à l'engagement du ligand, PD-1 est phosphorylé au niveau de son motif ITSM, recrutant la tyrosine phosphatase SHP-2 (PTPN11), qui déphosphoryle des molécules clés de signalisation proximale du TCR telles que ZAP70, PKCθ et CD3ζ, inhibant ainsi directement l'activation des lymphocytes T. Références associées : PMID:32184441

• Les tumeurs exploitent l'axe inhibiteur PD-1/PD-L1 pour échapper à la surveillance immunitaire ; l'interaction avec PD-L1 sur les cellules tumorales inhibe les fonctions effectrices des lymphocytes T cytotoxiques (CTL), favorisant l'échappement immunitaire. Références associées : PMID:28951311

• Le blocage de la voie PD-1 inverse l'épuisement des lymphocytes T, restaure l'immunité antitumorale et constitue la base mécanistique de la thérapie par inhibiteurs de points de contrôle immunitaires en oncologie. Références associées : PMID:22658127 PMID:25034862 PMID:25399552

• PD-1 est une glycoprotéine transmembranaire de type I située sur la membrane cellulaire, appartenant à la superfamille des immunoglobulines.

• La protéine subit des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation, la glycosylation N-liée et l'ubiquitination, qui modulent son expression et son activité de signalisation.

• Sa queue intracellulaire contient un motif ITSM essentiel pour le recrutement de SHP-2, tandis que la région extracellulaire comprend un domaine de type immunoglobuline V responsable de l'interaction avec le ligand.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales. Incluez des contrôles isotypiques appropriés et des réactifs de blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Validez l'expression de PD-1 sur des lymphocytes T humains activés ou des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) de singe cynomolgus comme système de contrôle positif.
• Utilisez des cellules fraîchement isolées lorsque c'est possible, et évitez une stimulation prolongée qui pourrait diminuer l'expression de PD-1, afin d'assurer une coloration fiable.
• Préparez des suspensions de cellules uniques et filtrez avant l'acquisition pour éviter les obstructions et garantir des données de haute qualité. Effectuez l'exclusion des cellules mortes pour améliorer la spécificité.
• Pour les panels multicolores, confirmez la compatibilité des fluorochromes et les paramètres de compensation, car le PerCP/Cyanine5.5 présente un chevauchement spectral avec d'autres colorants rouges.

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