Anticorps monoclonal de lapin anti-CD45 Humain/Singe conjugué à PerCP/Cyanine5.5 pour la cytométrie en flux - P08575

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD45

• Le CD45, également connu sous le nom d'antigène commun des leucocytes (L-CA) ou T200, est une tyrosine-protéine phosphatase C de type récepteur codée par le gène PTPRC. De multiples isoformes résultent d'un épissage alternatif, avec des poids moléculaires allant d'environ 131 à 147 kDa.
• Le CD45 est essentiel à l'activation des lymphocytes T via le récepteur antigénique, agissant comme un régulateur positif de la co-activation lors de la liaison à la DPP4. Il recrute et déphosphoryle SKAP1 et FYN, et module l'activité de LYN (PubMed:35767951). Références associées : PMID:35767951
• Il fonctionne comme une protéine tyrosine phosphatase, le premier domaine PTPase présentant une activité enzymatique et le second domaine influençant la spécificité du substrat.
• Le CD45 interagit avec CLEC10A au niveau du contact cellule présentatrice d'antigène – lymphocyte T, où CLEC10A sur les cellules dendritiques immatures reconnaît le CD45 porteur d'antigène Tn sur les lymphocytes T effecteurs, modulant le seuil d'activation des lymphocytes T pour limiter l'autoréactivité.
• Lors d'une infection à cytomégalovirus, le CD45 sert de récepteur pour la protéine virale UL11, médiant la liaison aux lymphocytes T et conduisant à une phosphorylation tyrosine réduite des protéines de signalisation et à une prolifération des lymphocytes T altérée.
• Il se localise à la membrane cellulaire, aux radeaux membranaires et à la synapse immunologique, ce qui est cohérent avec son rôle dans la signalisation.
• Le CD45 est une glycoprotéine et une phosphoprotéine, jouant des rôles clés dans l'interaction hôte-virus, et des mutations sont associées au SCID (déficit immunitaire combiné sévère).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 26-577 du CD45 humain (P08575). Ce domaine extracellulaire est couramment ciblé pour les applications de cytométrie en flux ; prenez ceci en compte lors de la conception de votre panel de marquage.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de marquage optimale. Incluez des contrôles isotypiques appropriés et des colorants de viabilité. Étant donné que le CD45 est exprimé sur toutes les cellules hématopoïétiques, des stratégies de gating minutieuses sont conseillées pour distinguer les sous-populations leucocytaires.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec le CD45 humain et de cynomolgus (Cynomolgus). Lorsque vous travaillez avec des échantillons de cynomolgus, validez le profil de marquage dans le système d'échantillon pertinent pour confirmer la réactivité et la spécificité.
• Il existe de multiples isoformes du CD45 (131-147 kDa), et l'anticorps peut reconnaître diverses isoformes selon l'emplacement de l'épitope. Si une détection isoforme-spécifique est requise, confirmez la reconnaissance par western blot ou analyse antigénique.

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