Anticorps monoclonal de lapin anti-CD94 humain PerCP/Cyanine5.5 pour cytométrie en flux - Q13241

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du CD94

• Le CD94 (KLRD1) est un récepteur transmembranaire de type lectine C qui forme des hétérodimères liés par des ponts disulfure avec NKG2A (KLRC1) ou NKG2C (KLRC2). Ces complexes reconnaissent la molécule non classique du CMH de classe I HLA-E présentant des peptides du soi, permettant ainsi aux cellules immunitaires de surveiller l’expression du CMH de classe I. Références associées : PMID:10023772, PMID:18064301, PMID:18083576, PMID:12387742, PMID:9430220

• L’hétérodimère KLRD1-KLRC1 agit comme un récepteur inhibiteur. Sur les cellules NK, il recrute des phosphatases à tyrosine par l’intermédiaire de motifs ITIM afin d’atténuer les signaux d’activation. Sur les cellules T CD8+, il antagonise la signalisation du TCR et favorise l’épuisement dans les microenvironnements tumoraux riches en HLA-E. Références associées : PMID:30860984, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:18064301, PMID:30503213, PMID:12165520

• À l’inverse, l’hétérodimère KLRD1-KLRC2 agit comme un récepteur activateur. Il reconnaît HLA-E présentant des peptides dérivés de HLA-G et induit des réponses adaptatives des cellules NK aux infections virales ainsi que la tolérance materno-fœtale. La signalisation s’effectue via l’adaptateur DAP12, entraînant une phosphorylation et l’activation cellulaire. Références associées : PMID:15940674, PMID:9655483, PMID:30134159, PMID:9754572, PMID:20952657, PMID:21825173

• Le CD94 est exprimé à la surface de la membrane plasmique des cellules NK, des cellules T αβ CD8+ mémoire/effectrices, des cellules T γδ et de certains lymphocytes T cytotoxiques spécifiques de tumeurs. Le profil d’expression des complexes de récepteurs inhibiteurs et activateurs varie selon les sous-populations lymphocytaires.

• Lors d’une infection par le SARS-CoV-2, le peptide de la protéine Spike virale peut être présenté par HLA-E et engager KLRD1-KLRC1, ce qui entraîne un épuisement fonctionnel des cellules NK cytotoxiques et des cellules T CD8+, altérant ainsi la surveillance immunitaire antivirale. Référence associée : PMID:32859121

• Le CD94 est une glycoprotéine transmembranaire à orientation de type II à passage unique (ancrage par peptide signal), qui contient un domaine de type lectine C et présente un pont disulfure. L’épissage alternatif produit plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène comprend les acides aminés 32-179 du CD94 humain, correspondant au domaine extracellulaire de type lectine C. La conception de ce domaine suggère que l’anticorps peut reconnaître le CD94 natif correctement replié à la surface cellulaire, ce qui le rend adapté aux applications de cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, effectuez un titrage de l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour votre type d’échantillon. Incluez des contrôles isot isotypiques appropriés et envisagez un blocage des récepteurs Fc afin de réduire les liaisons non spécifiques.
• L’anticorps étant directement conjugué à PerCP/Cyanine5.5, il est prêt à l’emploi dans les panels multicolores. Vérifiez sa compatibilité avec la configuration laser et les filtres de votre instrument, et procédez aux ajustements de compensation nécessaires.
• Il est indiqué que l’anticorps présente une réactivité croisée avec le CD94 humain. Validez l’essai sur des lignées cellulaires humaines pertinentes ou des populations primaires de cellules NK/T afin de confirmer la réactivité dans votre système expérimental spécifique.

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