PerCP Lapin anti-Humain/Singe CD8a mAb - P01732

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD8a

• Le CD8a (glycoprotéine de surface des lymphocytes T, chaîne alpha CD8) est une glycoprotéine transmembranaire codée par le gène CD8A (ID du gène : 925). Il est également connu sous le nom de T8/Leu-2 et p32.
• Agit comme un corécepteur pour les molécules de classe I du CMH sur les cellules présentatrices d'antigène, interagissant simultanément avec le récepteur des lymphocytes T (TCR) pour recruter la kinase Src LCK, initiant une signalisation intracellulaire conduisant à l'activation des lymphocytes T cytotoxiques, à la production de cytokines, à la motilité et à l'adhésion.
• Joue un rôle critique dans l'immunité adaptative en permettant aux lymphocytes T cytotoxiques de reconnaître et d'éliminer les cellules infectées et les cellules tumorales.
• Dans les cellules natural killer (NK), les homodimères CD8A fournissent un mécanisme de survie permettant la conjugaison et la lyse de plusieurs cellules cibles, et favorisent la survie et la différenciation des lymphocytes activés en lymphocytes T CD8 à mémoire.
• Le CD8 est typiquement un hétérodimère lié par des ponts disulfures des chaînes alpha (CD8A) et bêta (CD8B) sur les lymphocytes T dérivés du thymus, mais peut également être exprimé sous forme d'homodimère CD8A sur des sous-ensembles de cellules NK, de lymphocytes T à mémoire, de lymphocytes intra-épithéliaux, de monocytes et de cellules dendritiques.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire et les formes sécrétées ; c'est une lipoprotéine avec une hélice transmembranaire, qui subit des modifications post-traductionnelles telles que la glycosylation, la formation de ponts disulfures et la palmitoylation.
• Appartient à la superfamille des immunoglobulines, contenant un domaine immunoglobulinique. L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• Exprimé sur les cellules dendritiques plasmacytoïdes lors d'une stimulation par le virus de l'herpès simplex de type 1, indiquant un rôle dans les réponses antivirales.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 22-182) couvre le domaine extracellulaire de CD8A, ce qui est prédit pour générer des anticorps reconnaissant la protéine native de surface cellulaire. Pour la cytométrie en flux, envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et votre protocole de coloration.
• Comme cet anticorps est conjugué à la PerCP, assurez-vous que votre cytomètre en flux est équipé de lasers et de filtres appropriés (généralement excitation à 488 nm, émission à 675 nm). La PerCP est sensible au photoblanchiment ; manipulez les échantillons colorés dans l'obscurité et évitez une exposition prolongée à la lumière.
• La réactivité croisée a été validée pour l'humain et le singe cynomolgus. Si vous utilisez d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence de la région de l'immunogène pour prédire la réactivité croisée potentielle et validez expérimentalement.
• Pour la coloration intracellulaire, une étape de perméabilisation peut être nécessaire. Incluez des contrôles d'isotype appropriés pour distinguer la coloration spécifique.

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