Anticorps monoclonal de lapin PER2 (Humain) pour WB, ELISA, ChIP - O15055

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PER2

• PER2 (Protéine homologe circadienne Period 2), également connue sous le nom de protéine d'horloge circadienne PERIOD 2, est un composant central de l'horloge moléculaire circadienne. Elle agit comme un répresseur transcriptionnel au sein de la boucle de rétroaction transcription/traduction (TTFL) qui génère des rythmes d'environ 24 heures dans l'expression des gènes.
• Avec PER1, CRY1 et CRY2, PER2 forme le bras négatif de la TTFL. Il interagit directement avec les hétérodimères CLOCK-BMAL1 au niveau des promoteurs de type boîte-E pour inhiber sa propre expression, tandis que les modifications post-traductionnelles (par exemple, phosphorylation, acétylation, ubiquitination) ajustent finement la période (tau) des rythmes circadiens.
• PER2 contribue à la répression contrôlée par l'horloge via plusieurs modes : il recrute des complexes de remodelage de la chromatine SIN3‑HDAC et des méthyltransférases H3K9 (SUV39H1/2) sur les promoteurs des gènes de l'horloge, et il interagit également avec des protéines de liaison à l'ARN et des hélicases au niveau des sites de terminaison 3′ pour moduler la terminaison de la transcription.
• La protéine est impliquée dans la régulation métabolique et cardiovasculaire. Elle agit comme un coactivateur de PPARA et un corépresseur de NR1D1, se liant de manière rythmique aux promoteurs de gènes tels que BMAL1 et G6PC1, et elle réprime l'adipogenèse médiée par PPARG. PER2 régule également la production d'oxyde nitrique et de prostaglandines dans les aortes et contrôle la capture du glutamate via l'expression de VGLUT1.
• Des mutations bi-alléliques entraînant une perte de fonction de PER2 provoquent le syndrome familial de phase de sommeil avancée (FASPS), soulignant son rôle essentiel dans l'ajustement de l'horloge circadienne aux cycles lumière-obscurité environnementaux.
• PER2 se localise principalement dans le noyau mais se trouve également dans le cytoplasme, la région périnucléaire et le nucléole, reflétant un transport dynamique et des fonctions spécifiques à chaque compartiment.
• La protéine est largement exprimée, avec des niveaux élevés dans le muscle squelettique et le pancréas, et des niveaux plus faibles dans le poumon. L'isoforme 2 est spécifiquement détectée dans les kératinocytes.
• Les caractéristiques structurelles clés incluent deux domaines PAS et un domaine de localisation cytoplasmique C-terminal qui contribuent aux interactions protéine-protéine et au trafic intracellulaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 1–100 du PER2 humain (O15055), une région N-terminale bien conservée et susceptible de générer des anticorps reconnaissant à la fois les isoformes pleine longueur et tronquées.
• Pour le western blot (WB), attendez-vous à une bande d'environ 137 kDa ; utilisez des lysats nucléaires ou de cellules entières provenant de tissus humains ou de lignées cellulaires connues pour exprimer PER2 (par ex., muscle squelettique, pancréas). Les niveaux endogènes de PER2 oscillent au cours du cycle circadien — envisagez de collecter les échantillons à des temps zeitgeber définis.
• Pour les applications ELISA, le couplage de l'anticorps avec un réactif de détection ciblant un épitope non chevauchant peut améliorer la sensibilité et la spécificité ; validez la plage dynamique en utilisant la protéine PER2 recombinante ou des lysats cellulaires contrôlés.
• Dans l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), l'anticorps peut enrichir les régions promotrices contenant des boîtes-E de gènes contrôlés par l'horloge (par ex., PER1, CRY1). Incluez des régions de contrôle négatif appropriées et confirmez l'enrichissement par qPCR dans des conditions d'horloge synchronisées.
• Étant donné le rôle des modifications post-traductionnelles dans la fonction de PER2, envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases ou des conditions dénaturantes si vous étudiez les interactions ou la localisation dépendantes de la phosphorylation.

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