Anticorps monoclonal PE/Cyanine7 de lapin anti-TIM-3/HAVCR2 humain pour cytométrie en flux - Q8TDQ0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TIM-3/HAVCR2

• TIM-3/HAVCR2 (CD366) est un récepteur de surface cellulaire qui régule finement l'immunité innée et adaptative, exerçant généralement des fonctions inhibitrices mais capable d'une co-stimulation selon le contexte cellulaire et l'engagement des ligands.
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• Il supprime les réponses auto-immunes et allo-immunes médiées par Th1, favorise la tolérance immunologique et attenue la signalisation TCR des CD8+ en bloquant NF-κB/NFAT et en réduisant la sécrétion d'IL-2, probablement via une association avec LCK et le recrutement de PTPRC dépendant de LGALS9 ; il régule également l'activation des macrophages.
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• Sur les cellules Treg, TIM-3 inhibe les réponses Th17, tandis que sur les cellules NK il joue un double rôle : il améliore la production d'IFN-γ après engagement de LGALS9 tout en supprimant la cytotoxicité naturelle.
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• Il agit comme récepteur pour la galectine-9 (LGALS9), qui peut déclencher l'apoptose des lymphocytes T et l'immunosuppression, bien que cette interaction reste débattue ; TIM-3 se lie également à la phosphatidylsérine pour médier la phagocytose des cellules apoptotiques par les cellules dendritiques.
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• Au niveau sous-cellulaire, TIM-3 se localise sur la membrane cellulaire et les jonctions cellulaires. Son expression concerne les lymphocytes Th1, les Tregs, les cellules dendritiques, les cellules NK et les tissus épithéliaux, avec une surexpression marquée dans les infections virales chroniques comme l'HCV et le VIH.
• Après traduction, TIM-3 est une glycoprotéine présentant des liaisons disulfure, une palmitoylation, une phosphorylation et une ubiquitination, ce qui reflète un renouvellement régulé et des interactions de signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 22‑200) couvre l'ensemble du domaine extracellulaire, ce qui rend cet anticorps parfaitement adapté pour détecter TIM‑3 de surface en cytométrie en flux sur cellules vivantes ; nous recommandons d'utiliser le conjugué PE/Cyanine7 pour obtenir un signal intense et un recouvrement spectral minimal avec les canaux FITC et PE.
• Comme l'expression de TIM‑3 est très dynamique et surexprimée après activation des lymphocytes T, stimulez vos cellules (par exemple avec anti‑CD3/CD28) ou intégrez des conditions d'activation connues pour améliorer la sensibilité de détection.
• Lors de la conception de panels multicolores, prenez en compte le photoblanchiment du PE/Cyanine7 et la liaison non spécifique ; titrez l'anticorps et incluez des contrôles d'isotype et FMO appropriés pour garantir un tri précis.
• L'anticorps est validé sur des échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas spécifiée, donc validez-la dans votre système d'échantillons si vous travaillez avec des cellules non humaines.

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