Ac mAb Lapin anti-Humain PD-L1/CD274 PE/Cyanine7 pour Cytométrie en flux - Q9NZQ7

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PD-L1/CD274

• Le PD-L1 (ligand 1 de mort cellulaire programmée 1), également connu sous le nom de B7-H1, est une protéine transmembranaire de type I et un membre de la famille B7 des ligands régulateurs immunitaires.
• Agit comme un ligand pour le récepteur inhibiteur PD-1 (PDCD1), jouant un rôle critique dans le maintien de la tolérance immunitaire en modulant les seuils d'activation des cellules T et en limitant les réponses effectrices. Références associées : PMID:11015443 PMID:28813410 PMID:28813417
• Peut également co-stimuler des sous-ensembles de cellules T qui produisent de l'IL-10 via un récepteur activateur non identifié. Références associées : PMID:10581077
• Dans les tumeurs, l'interaction PD-1/PD-L1 inhibe la fonction effectrice des lymphocytes T cytotoxiques (CTL), contribuant à l'évasion immunitaire ; le blocage de cette voie peut inverser l'épuisement des cellules T et normaliser les réponses anti-tumorales. Références associées : PMID:28813410 PMID:28813417
• En réponse à l'hypoxie, le PD-L1 se transloque dans le noyau et agit comme un co-activateur de transcription pour promouvoir la transcription de GSDMC, conduisant à la pyroptose. Références associées : PMID:32929201
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, les membranes des endosomes précoces et de recyclage, le noyau, et peut également être sécrétée.
• Large expression dans les tissus, avec des niveaux élevés dans le cœur, le muscle squelettique, le placenta et le poumon ; également présent sur les cellules T activées, les cellules B, les cellules dendritiques, les kératinocytes et les monocytes.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, les ponts disulfure et l'ubiquitination ; la protéine possède des domaines de type immunoglobuline et une hélice transmembranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1 à 290 du PD-L1 humain, contenant le domaine extracellulaire ; cette conception favorise la reconnaissance de la conformation native sur les cellules vivantes.
• Pour la cytométrie en flux, envisagez d'utiliser des réactifs de blocage des récepteurs Fc et des contrôles isotypiques appropriés pour minimiser la liaison non spécifique.
• Optimisez le titrage de l'anticorps pour votre type de cellules et votre instrument ; les concentrations de départ typiques vont de 0,5 à 5 µg/mL.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon pertinent, tel que des cellules immunitaires activées ou des lignées cellulaires tumorales, et incluez des marqueurs de viabilité pour exclure les cellules mortes.
• En raison de l'internalisation et du recyclage du PD-L1, une manipulation douce des cellules et de courts temps d'incubation à 4°C peuvent aider à préserver le marquage de surface.

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