Anticorps Monoclonaux de Lapin anti-IFN-gamma Humain conjugué PE/Cyanine7 pour Cytométrie en Flux Intracellulaire - P01579

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Interféron Gamma

• L'interféron gamma (IFN-γ) est un interféron de type II sécrété principalement par les lymphocytes T activés et les cellules natural killer (NK), agissant comme une cytokine pléiotrope clé dans la régulation immunitaire.
• Il exerce des réponses antimicrobiennes, antivirales et antitumorales cruciales en activant les cellules immunitaires effectrices et en améliorant la présentation des antigènes.
  Références connexes :
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  PMID:8666937
• Lors de sa liaison à son récepteur IFNGR1, l'IFN-γ déclenche la cascade de signalisation JAK-STAT, conduisant à l'activation de STAT1, à sa translocation nucléaire et à la transcription des gènes régulés par l'IFN-γ, y compris des facteurs de transcription tels que IRF1.
  Références connexes :
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• L'IFN-γ améliore la présentation des antigènes du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe I en induisant le remplacement des sous-unités du protéasome constitutif par des sous-unités de l'immunoprotéasome, et en régulant à la hausse l'activateur PA28, augmentant ainsi la quantité, la qualité et le répertoire des peptides pour le chargement du CMH de classe I.
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• Il régule également à la hausse les complexes du CMH de classe II à la surface cellulaire en favorisant l'expression de molécules clés telles que les cathepsines B, H et L, optimisant davantage la présentation des antigènes.
  Références connexes :
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• Participe à la régulation du développement, de la quiescence et de la différenciation des cellules souches hématopoïétiques dans des conditions homéostatiques. (Par similitude)
• L'IFN-γ est une glycoprotéine sécrétée avec une masse moléculaire calculée d'environ 19,3 kDa ; elle est caractérisée par un peptide signal, une glycosylation et un site de clivage sur une paire de résidus basiques (Mots-clés UniProt).

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, établissez des conditions de fixation et de perméabilisation cellulaires appropriées pour permettre la détection de l'IFN-γ dans les cellules T ou NK activées ; les stimulants courants incluent le PMA/ionomycine en présence d'un inhibiteur du transport des protéines.
• L'immunogène (aa 24–166) correspond à la forme sécrétée mature de l'IFN-gamma humain ; ainsi, l'anticorps est censé reconnaître la cytokine accumulée intracellulairement, le rendant adapté aux dosages fonctionnels de cytokines.
• Incluez des contrôles de compensation appropriés lors de l'utilisation du conjugué PE/Cyanine7 dans des panneaux multicolores, et envisagez d'utiliser un canal de rejet (dump channel) ou un marqueur de viabilité pour exclure les cellules mortes.
• Validez la spécificité de la coloration sur des échantillons de témoins positifs et négatifs pertinents, tels que des cellules mononucléaires du sang périphérique humain stimulées par rapport à non stimulées, pour confirmer la détection de l'IFN-γ endogène.

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