Anticorps Monoclonal Anti-Mouse Ly-6A/E (Sca-1) Conjugué PE/Cyanine7 pour Cytométrie en Flux - P05533

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Antigène Lymphocytaire 6A-2/6E-1 (Sca-1)

• L'antigène lymphocytaire 6A-2/6E-1, communément appelé antigène 1 des cellules souches (Sca-1) ou protéine d'activation des cellules T (TAP), est codé par le gène Ly6a chez la souris et appartient à la superfamille Ly-6/uPAR des protéines ancrées par un glycosylphosphatidylinositol (GPI).
• Sca-1 est un marqueur bien établi des cellules souches hématopoïétiques et des cellules progénitrices murines, et est largement exprimé dans plusieurs tissus.
• La fonction principale de Sca-1 est liée à l'activation des cellules T, où elle peut moduler la signalisation lors de l'engagement, contribuant ainsi à la régulation de la réponse immunitaire.
• Sca-1 est ancré au feuillet externe de la membrane plasmique via une ancre GPI, sans domaine transmembranaire ou cytoplasmique, s'appuyant sur l'association aux radeaux lipidiques pour la transduction du signal.
• En tant que glycoprotéine ancrée par GPI, Sca-1 subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation N-liée et l'ajout de l'ancre GPI, qui sont critiques pour sa localisation membranaire et sa fonction.
• La protéine contient des ponts disulfure conservés qui stabilisent son repliement à trois doigts caractéristique de la famille Ly-6, facilitant les interactions protéine-protéine.
• Le poids moléculaire observé de Sca-1 dépasse souvent sa masse calculée (14,4 kDa) en raison d'une glycosylation extensive, avec une détection typique autour de 115 kDa en SDS-PAGE dans des conditions réductrices.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Cet anticorps a été généré en utilisant un immunogène recombinant couvrant le domaine extracellulaire (acides aminés 27-111) du Sca-1 de souris, ciblant la conformation native pour une reconnaissance supérieure en cytométrie en flux.
• Pour les applications de cytométrie en flux, envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale, et incluez des contrôles isotypiques appropriés ainsi que des étapes de blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Notez que le conjugué PE/Cyanine7 est sensible à la lumière et aux cycles de congélation-décongélation ; protégez-le toujours de la lumière et évitez les congélations répétées.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans la souche de souris ou la lignée cellulaire pertinente, car des variations alléliques (ex. Ly-6A.2 vs Ly-6E.1) existent ; l'immunogène correspond à l'allèle Ly-6A.2.
• L'expression de Sca-1 peut être régulée à la hausse lors de l'activation dans les cellules T ; des expériences en cours de temps peuvent être nécessaires pour capturer les changements dynamiques d'expression.

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