Anticorps monoclonal anti-CD3 humain de souris conjugué PE/Cyanine5 pour la cytométrie en flux - P07766

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD3 epsilon

• CD3E code pour la chaîne epsilon de CD3, une sous-unité centrale du complexe récepteur des lymphocytes T (TCR)-CD3, essentielle pour l'immunité adaptative en transduisant les signaux d'activation après la reconnaissance de l'antigène. Références associées : PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Les motifs d'activation à base de tyrosine (ITAMs) intracellulaires dans CD3E sont phosphorylés par les kinases LCK et FYN lors de l'engagement du TCR, créant des sites d'ancrage pour ZAP70 et initiant des cascades de signalisation en aval. Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325
• CD3E contribue au développement correct des lymphocytes T et à la sélection des thymocytes, assurant la formation d'un répertoire immunitaire approprié.
• Le domaine cytoplasmique de CD3E contient des motifs d'endocytose qui médient l'internalisation et la régulation à la baisse du TCR-CD3, modulant la réactivité des lymphocytes T après stimulation. Références associées : PMID:10384095 PMID:26507128
• En tant que récepteur pour ITPRIPL1, CD3E peut inhiber l'activation des lymphocytes T en recrutant NCK1, ce qui empêche la liaison de ZAP70 et bloque la signalisation ERK-NFkB et l'influx calcique. Références associées : PMID:12110186 PMID:38614099
• CD3E est une protéine membranaire de type I à passage unique avec un domaine extracellulaire de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique ; elle se localise exclusivement à la membrane plasmique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation des ITAMs et une liaison disulfure conservée qui stabilise sa structure extracellulaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps, produit contre la protéine CD3 humaine recombinante, est validé pour la cytométrie en flux ; pour d'autres applications, envisagez de réaliser des expériences pilotes pour confirmer la réactivité dans votre système d'échantillonnage.
• Lors de la mise en place de panels de cytométrie en flux multicolores, incluez des contrôles de compensation appropriés et titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de marquage optimale.
• En tant que conjugué à colorant tandem, le PE/Cyanine5 est sensible à la lumière et aux fixateurs ; minimisez l'exposition à la lumière, utilisez des tampons de marquage glacés et évitez une fixation prolongée pour préserver l'intensité du signal.
• Pour le marquage intracellulaire ou la détection du phospho‑CD3, validez les conditions de perméabilisation, car des traitements agressifs peuvent altérer l'accessibilité de l'épitope ou la stabilité du colorant.

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