Anticorps monoclonal Rat anti-Mouse CD3 conjugué à la PE pour cytométrie en flux - P04235 / P22646

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD3

• Le CD3 est un complexe à chaînes multiples composé des chaînes delta, epsilon, gamma et zêta ; cet anticorps réagit avec les chaînes delta et epsilon du CD3 (SWISS : P04235/P22646) qui s'assemblent avec le récepteur des cellules T (TCR) pour former le complexe TCR-CD3 à la surface des lymphocytes T.
• Le complexe TCR-CD3 est essentiel pour l'immunité adaptative, transduisant des signaux des cellules présentatrices d'antigènes lors de l'engagement du TCR via des motifs d'activation basés sur la tyrosine des récepteurs immunologiques (ITAM) dans les domaines cytoplasmiques des chaînes CD3.
• La chaîne CD3 delta (P04235) joue un rôle critique dans la différenciation des thymocytes ; en l'absence d'un complexe TCR-CD3 fonctionnel, les thymocytes ne parviennent pas à se différencier correctement, soulignant son importance dans le développement des cellules T. Références connexes : PMID:10935641
• Les chaînes CD3 interagissent avec les corécepteurs CD4 et CD8, établissant une liaison fonctionnelle nécessaire pour l'activation et la sélection positive des cellules T CD4+ ou CD8+.
• La localisation subcellulaire est confinée à la membrane cellulaire, où le CD3 fonctionne comme un complexe récepteur membranaire intégral.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation des ITAM par les kinases de la famille Src LCK et FYN, ainsi que la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui sont critiques pour la transduction du signal et l'intégrité structurelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps est fourni sous forme de conjugué PE, permettant un marquage direct en une seule étape pour la cytométrie en flux ; des expériences de titration sont recommandées pour déterminer la concentration optimale pour votre type d'échantillon spécifique.
• Validez l'anticorps sur des populations de lymphocytes de souris (par exemple, splénocytes, thymocytes) et utilisez des contrôles d'isotype appropriés pour confirmer la spécificité.
• Puisque l'immunogène est un peptide synthétique dérivé du CD3 de souris, l'épitope peut être linéaire et robuste ; cependant, des colorants de viabilité fixables ou d'autres combinaisons de fluorochromes doivent être testés pour les panneaux multicolores.
• Considérez les protocoles de marquage de surface et évitez la perméabilisation, sauf si l'épitope est préservé, car la fixation/perméabilisation peut affecter certains épitopes.

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