Anticorps monoclonal de lapin anti-rat CD8a conjugué à la PE pour la cytométrie en flux - P07725

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la CD8a

• La CD8a est la chaîne alpha de la glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD8, également connue sous le nom d'antigène membranaire OX-8 ou de chaîne de 32 kDa de l'antigène CD8. Elle est essentielle pour l'immunité adaptative, servant de corécepteur pour les molécules du CMH de classe I sur les cellules présentatrices d'antigènes.
• Le corécepteur CD8 se lie au domaine alpha-3 relativement invariant du CMH de classe I tandis que le récepteur des lymphocytes T (TCR) interagit avec les domaines alpha-1 et alpha-2 présentant le peptide, permettant ainsi la reconnaissance par le lymphocyte T des peptides dérivés d'antigènes cytosoliques.
• Lors de la co-engagement avec le complexe TCR-CD3, la CD8a recrute la kinase Src LCK au niveau du domaine cytoplasmique, initiant des cascades de signalisation qui favorisent la production de lymphokines, l'adhésion des lymphocytes T, la motilité et l'activation cytotoxique contre les cellules infectées ou transformées.
• Les homodimères de CD8a exprimés sur les cellules tueuses naturelles (NK) fournissent un mécanisme de survie qui permet la conjugaison et la lyse en série de plusieurs cellules cibles, tout en soutenant la différenciation et le maintien des lymphocytes T CD8+ mémoire.
• La localisation subcellulaire est principalement à la membrane cellulaire en tant que glycoprotéine transmembranaire à passage unique, la région extracellulaire contenant un domaine de type immunoglobuline.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la N-glycosylation et la palmitoylation au niveau d'une cystéine cytoplasmique, ce qui peut influencer l'association aux radeaux membranaires et la signalisation.
• Spécificité tissulaire : principalement exprimée sur les lymphocytes T cytotoxiques, les cellules NK et certains sous-ensembles de cellules dendritiques, avec un poids moléculaire d'environ 32 kDa (forme glycosylée) contre 26 kDa pour le polypeptide non modifié.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est constitué d'une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 26-189 du CD8a de rat (domaine extracellulaire), ce qui est censé générer des anticorps reconnaissant l'épitope natif exposé à la surface des cellules vivantes.
• Cet anticorps monoclonal de lapin conjugué à la PE est conçu pour la détection directe par cytométrie en flux des cellules CD8a-positives dans des échantillons de rat ; envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la dilution optimale pour votre type d'échantillon et le signal de fond.
• Pour les panels de cytométrie en flux multicolores, assurez-vous d'inclure des contrôles appropriés de coloration simple et de fluorescence moins un (FMO) pour délimiter avec précision les populations CD8a+ sans artefacts de chevauchement spectral.
• Étant donné que la réactivité croisée n'est rapportée que pour le rat, validez la réactivité dans d'autres espèces si nécessaire ; des clones alternatifs ou d'autres espèces hôtes peuvent être nécessaires pour une réactivité plus large.
• Pour l'immunohistochimie ou d'autres applications non listées, une validation expérimentale est recommandée car l'anticorps n'est validé que pour la FC.

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