Anticorps monoclonal anti-CD25 de rat conjugué PE de lapin pour la cytométrie en flux - P26897

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD25 (sous-unité alpha du récepteur à l'interleukine-2)

• Le CD25, également connu sous le nom de sous-unité alpha du récepteur à l'interleukine-2, IL-2Rα ou antigène TAC, est une protéine membranaire de type I codée par le gène Il2ra chez le rat (UniProt P26897).
• Il sert de sous-unité alpha du récepteur à haute affinité de l'interleukine-2 (IL-2). Avec les sous-unités bêta (CD122) et gamma (CD132), il se lie à l'IL-2 et médie une signalisation cruciale pour l'homéostasie immunitaire.
• Le récepteur joue un rôle clé dans la tolérance immunitaire en contrôlant l'activité des lymphocytes T régulateurs (Tregs), qui suppriment l'activation et l'expansion des lymphocytes T autoréactifs.
• Le CD25 est exprimé de manière constitutive à des niveaux élevés sur les lymphocytes T régulateurs CD4+Foxp3+ et est transitoirement régulé à la hausse sur les lymphocytes T effecteurs activés, ce qui en fait un marqueur important pour les études immunologiques.
• La région extracellulaire contient deux domaines Sushi (CCP/SCR), caractéristiques des protéines de contrôle du complément et impliqués dans la liaison au ligand.
• Les caractéristiques structurales clés comprennent un peptide signal N-terminal, de multiples répétitions Sushi, un seul hélice transmembranaire et une courte queue cytoplasmique. La protéine est modifiée par une glycosylation N-liée et contient des ponts disulfure intra-chaîne.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène pour cet anticorps monoclonal comprend les acides aminés 22-235 du CD25 de rat, ce qui correspond à l'ensemble du domaine extracellulaire. Cette conception cible la région native, distale de la membrane, accessible dans les cellules intactes.
• En tant qu'anticorps conjugué au PE, il est principalement destiné à la cytométrie en flux. Nous recommandons un titrage initial en utilisant un modèle cellulaire pertinent (par exemple, des splénocytes de rat activés ou des lignées de lymphocytes T) pour identifier la concentration de marquage optimale.
• Utilisez un contrôle isotypique approprié pour distinguer le marquage positif du bruit de fond. Un blocage approprié des récepteurs Fc est conseillé lors du marquage de cellules exprimant fortement le FcγR.
• Comme l'expression du CD25 peut être sensible à la fixation et à la perméabilisation, validez votre protocole de préparation d'échantillon pour préserver les épitopes de surface si vous évaluez des marqueurs de surface cellulaire.
• Pour la détection intracellulaire du CD25, l'optimisation des étapes de perméabilisation est essentielle, car l'encombrement stérique peut altérer l'accessibilité de l'anticorps.

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