Anticorps monoclonal PE lapin anti-souris S100A9 pour cytométrie en flux intracellulaire - P31725

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de S100A9

• S100A9 est une protéine liant le calcium et le zinc qui joue un rôle central dans la régulation des processus inflammatoires et de la réponse immunitaire, notamment la chimiotaxie des neutrophiles, la phagocytose et la dégranulation.
  Références associées : PMID:15331440, PMID:17767165, PMID:18403730
• Intracellulairement, S100A9 facilite le trafic et le métabolisme de l'acide arachidonique dans les leucocytes, module le cytosquelette dépendant de la tubuline lors de la migration des phagocytes et active la NADPH-oxydase neutrophile.
  Références associées : PMID:15331440
• Extracellulairement, S100A9 exerce des activités pro-inflammatoires, antimicrobiennes, piégeant les oxydants et pro-apoptotiques.
  Références associées : PMID:21382888
• S100A9 agit comme une alarme ou un motif moléculaire associé aux dommages (DAMP), stimulant les cellules immunitaires innées en se liant au récepteur Toll-like 4 (TLR4) et au récepteur des produits finaux de glycation avancée (AGER).
  Références associées : PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• La liaison à TLR4 et à AGER active les voies de signalisation MAP-kinase et NF-kappa-B, amplifiant la cascade pro-inflammatoire.
  Références associées : PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• Existe principalement sous forme d'hétérodimère de calprotectine (S100A8/S100A9), qui intègre les fonctions immunitaires intracellulaires et extracellulaires.
• Présente une activité antimicrobienne contre les bactéries et les champignons, probablement via la chélation du Zn²⁺ essentiel à la croissance microbienne.
• S100A9 est majoritairement sécrété, mais on peut également le trouver dans le cytoplasme, associé au cytosquelette et sur la membrane cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant la totalité de la séquence de S100a9 de souris (résidus 1–113) ; l'anticorps est donc susceptible de reconnaître la protéine S100A9 native en cytométrie en flux intracellulaire. Pour un marquage optimal, réalisez une fixation et une perméabilisation adaptées aux protéines nucléaires/cytoplasmiques et titrez l'anticorps conjugué à la PE pour déterminer le meilleur rapport signal sur bruit.
• S100A9 est fortement exprimé dans les cellules de la lignée myéloïde (neutrophiles, monocytes, macrophages). Utilisez des contrôles positifs appropriés tels que la moelle osseuse ou les splénocytes de souris, et incluez des contrôles isotypes et un blocage des Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, confirmez la spécificité de l'anticorps en utilisant des cellules knockout pour S100A9 ou en réalisant un blocage avec l'immunogène recombinant si disponible.
• Comme il s'agit d'un anticorps primaire conjugué à la PE, il permet une détection directe en une étape, réduisant le bruit de fond dû aux anticorps secondaires et simplifiant les panneaux multicolores.

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