Anticorps monoclonal de Lapin anti-Souris IL-9 conjugué à la PE pour Cytométrie en flux (Intracellulaire) - P15247

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL-9

• L'interleukine-9 (IL-9), également connue sous le nom de cytokine P40 et de facteur de croissance des cellules T P40, est une cytokine multifonctionnelle codée par le gène Il9 chez la souris (UniProt P15247).
• L'IL-9 est principalement sécrétée par les lymphocytes T auxiliaires 2 (Th2), les mastocytes et les cellules NKT, et joue un rôle critique dans les réponses immunitaires contre les parasites, ainsi que dans l'inflammation allergique. Références connexes : PMID:11070175, PMID:19433802
• Elle module la perméabilité épithéliale intestinale et contribue à l'immunité adaptative, particulièrement dans les tissus muqueux. Références connexes : PMID:12704113
• L'IL-9 favorise la différenciation des cellules T auxiliaires productrices d'IL-17 (TH17) et stimule la prolifération et la différenciation des mastocytes, la liant aux voies inflammatoires et allergiques. Références connexes : PMID:11070175, PMID:19433802
• D'un point de vue mécanistique, l'IL-9 signale via un récepteur composé de la chaîne alpha de l'IL-9R et de la chaîne gamma commune (IL2RG), conduisant à l'activation des kinases JAK1 et JAK3 et des facteurs de transcription en aval STAT1, STAT3 et STAT5. STAT1 stimule principalement les gènes de différenciation, tandis que STAT3 et STAT5 médient les effets anti-apoptotiques. Références connexes : PMID:2145361, PMID:7718508, PMID:10464327
• La protéine IL-9 mature est une glycoprotéine sécrétée avec un poids moléculaire prédit d'environ 16 kDa (UniProt : 16075 Da) et contient des caractéristiques structurelles typiques de la famille des cytokines à faisceau de quatre hélices.
• La localisation subcellulaire est extracellulaire suite au clivage du peptide signal ; elle fonctionne comme médiateur soluble dans le milieu extracellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 19–114 de l'IL-9 de souris (NP_032399.1), ce qui englobe la protéine sécrétée mature dépourvue de peptide signal. Cette conception est susceptible de générer des anticorps reconnaissant la forme native et traitée de l'IL-9.
• En tant qu'anticorps monoclonal conjugué à la PE, il est optimisé pour la cytométrie en flux intracellulaire (FC intra). Pour la détection de l'IL-9 intracellulaire, les cellules doivent être fixées et perméabilisées à l'aide d'un protocole approprié avant le marquage. Une étape de stimulation (par exemple, avec PMA/ionomycine en présence d'un inhibiteur du transport des protéines) peut être nécessaire pour accumuler la cytokine à l'intérieur de la cellule pour certains types cellulaires.
• Puisque l'anticorps est signalé comme réagissant avec l'IL-9 de souris, la réactivité croisée avec l'humain ou d'autres espèces n'a pas été évaluée ; il est recommandé de valider la spécificité dans le système d'échantillon prévu.
• L'origine monoclonale lapine peut offrir une haute affinité et spécificité ; cependant, une titration est conseillée pour déterminer la concentration optimale pour chaque condition expérimentale.
• Notez que l'anticorps est expédié sur sacs de glace ; dès réception, stockez selon les recommandations (généralement à 2–8°C à l'abri de la lumière pour les anticorps conjugués) pour maintenir la stabilité.

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