Anticorps monoclonal de lapin anti-souris CD8a conjugué à la PE pour la cytométrie en flux - P01731

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD8a

• CD8a, également connu sous le nom de Ly-2 ou Lyt-2, est une glycoprotéine de surface des cellules T qui sert de corécepteur pour les molécules du CMH de classe I.
• Il joue un rôle essentiel dans la réponse immunitaire adaptative en interagissant simultanément avec le récepteur des cellules T (TCR) et les complexes CMH de classe I:peptide sur les cellules présentatrices d'antigènes.
• CD8a recrute la kinase Src LCK au complexe TCR-CD3, initiant des cascades de signalisation intracellulaire qui conduisent à l'activation des cellules T, à la production de lymphokines et à la fonction des lymphocytes T cytotoxiques (CTL).
• Dans les CTL, ce mécanisme permet la reconnaissance et l'élimination des cellules infectées ou tumorales, tandis que dans les cellules NK, les homodimères CD8A favorisent la survie et l'élimination en série des cellules cibles.
• La protéine est localisée à la membrane cellulaire en tant que glycoprotéine transmembranaire de type I et contient un domaine extracellulaire de type immunoglobuline.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent des liaisons disulfure, la glycosylation et la palmitoylation, qui contribuent à sa stabilité et à son association membranaire.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes, et l'expression de CD8a est une caractéristique des cellules T cytotoxiques et d'un sous-ensemble de cellules NK, jouant également un rôle dans la différenciation des cellules T CD8 mémoire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène consiste en une protéine recombinante couvrant les acides aminés 28–196 de la souris CD8a, représentant le domaine extracellulaire, ce qui assure la reconnaissance de l'antigène natif de surface cellulaire.
• Cet anticorps monoclonal conjugué à la PE est conçu pour la cytométrie en flux (FC) ; envisagez de titrer l'anticorp à des concentrations optimales pour votre type cellulaire spécifique et votre panel.
• Étant donné que CD8a est exprimé sur les cellules T cytotoxiques et certaines cellules NK, des stratégies de sélection (gating) appropriées et une coloration de viabilité sont recommandées pour obtenir une résolution claire des populations.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon pertinent (par exemple, splénocytes de souris ou lymphocytes infiltrant les tumeurs) et incluez des contrôles isotypiques pour confirmer la spécificité.
• Pour les panels de flux multicolores, vérifiez le chevauchement spectral potentiel de la PE avec d'autres fluorophores et utilisez les paramètres de compensation appropriés.

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