Anticorps monoclonal Lapin anti-Souris CD82 conjugué à la PE pour cytométrie en flux - P40237

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD82

• Le CD82, également connu sous le nom de Kai1, Tspan27, IA4, antigène C33 et protéine membranaire inductible R2, est un membre de la superfamille des tétraspanines. C'est un composant structurel des microdomaines enrichis en tétraspanines (TERMs), qui servent de plateformes pour le regroupement des récepteurs et la signalisation.
• Les fonctions principales incluent l'atténuation de la signalisation EGF en facilitant l'endocytose induite par le ligand et la désensibilisation de l'EGFR, médiées par l'ubiquitination et le trafic de l'EGFR via la phosphorylation CBL dépendante du PKC. Il module également l'adhésion et la migration cellulaires en régulant les intégrines telles qu'alpha4/ITA4, alpha6/ITGA6 et bêta1/ITGB1, et interfère avec l'activateur du plasminogène de type urokinase (PLAU) et son récepteur (PLAUR) pour diminuer l'activation du plasminogène.
• Dans les cellules immunitaires, le CD82 s'associe au CD4 ou au CD8 pour délivrer des signaux costimulateurs pour la voie TCR/CD3 et joue un rôle dans la limitation de la migration des phagocytes tout en soutenant l'activation des macrophages. Il est recruté vers les phagosomes contenant des pathogènes avant la fusion lysosomale et participe à la présentation des antigènes indépendamment de la signalisation des récepteurs Toll-like. Références connexes : PMID:21149584
• Le CD82 limite la migration des phagocytes mais soutient l'activation des macrophages et l'acquisition de phénotypes anti-inflammatoires. Références connexes : PMID:35754722
• Il contrôle le trafic du TLR9 vers les compartiments acidifiés contenant du CpG en régulant l'interaction entre le TLR9 et le VAMP3 et l'assemblage ultérieur du myddosome, et il inhibe les réponses inflammatoires induites par le LPS en empêchant la liaison du LPS au TLR4. Références connexes : PMID:31408613
• Dans l'angiogenèse, le CD82 agit pour faire passer l'environnement angiogénique à un état quiescent en liant et séquestrant le VEGFA et le PDGFA, inhibant ainsi la signalisation via leurs récepteurs de surface cellulaire respectifs. Références connexes : PMID:34530889
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, les vésicules cytoplasmiques et les phagosomes. L'expression tissulaire est la plus élevée dans la rate et le rein, avec de faibles niveaux dans le muscle squelettique et le cœur.
• La protéine est modifiée post-traductionnellement par palmitoylation et glycosylation, avec un poids moléculaire prédit d'environ 30 kDa (cohérent avec les 30kDa observés).

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1 à 266 du CD82 de souris, englobant les domaines extracellulaire et transmembranaire complets, ce qui soutient la reconnaissance des épitopes natifs pour les applications de cytométrie en flux.
• En tant qu'anticorps conjugué à la PE, il est prêt à l'emploi sans réactif de détection secondaire ; envisagez de titrer la dilution optimale pour votre type cellulaire spécifique et vos conditions expérimentales.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés et, si vous analysez des cibles intracellulaires ou des protéines phosphorylées, validez les protocoles de fixation et de perméabilisation dans votre système.
• Pour les échantillons de souris présentant une expression élevée de récepteurs Fc, envisagez d'utiliser un blocage Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• La réactivité croisée rapportée avec la souris suggère une adéquation pour les modèles murins ; vérifiez la réactivité dans d'autres espèces si nécessaire.
• Les performances peuvent varier en fonction des méthodes de préparation des cellules ; envisagez de valider avec des populations cellulaires positives et négatives connues.

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