mAb PE Lapin anti-souris CD43 - P15702

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Leukosialine (CD43)

• La leukosialine (CD43, sialophorine) est une sialoglycoprotéine transmembranaire majeure des leucocytes, caractérisée par un peptide signal, un grand domaine extracellulaire de type mucine, une seule hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique. Elle est fortement O-glycosylée et constitue la sialoprotéine majoritaire de la surface cellulaire.
• Régule de multiples fonctions des lymphocytes T, notamment l'activation, la prolifération, la différenciation, le trafic et la migration. Elle régule positivement le trafic vers les ganglions lymphatiques par association avec les protéines ERM (EZR, RDX, MSN) (PubMed:11728336, PubMed:17638845, PubMed:21289089). Références associées : PMID:11728336 PMID:17638845 PMID:21289089
• Régule négativement la différenciation des cellules Th2, orientant l'engagement vers la lignée Th1, et favorise l'expression de l'interféron-gamma après activation du TCR, influençant ainsi l'expression des récepteurs de cytokines et la signalisation (PubMed:18490738). Références associées : PMID:18490738
• Elle constitue un ligand majeur de la E-sélectine sur les cellules Th17, facilitant le roulement sur le vascular activé et le recrutement lors de l'inflammation ; essentielle pour l'adhésion des Th17 mais pas des Th1 à la E-sélectine (PubMed:26700769). Références associées : PMID:26700769
• Agit comme contre-récepteur pour SIGLEC1 (sialoadhésine) sur les macrophages et protège les cellules des signaux apoptotiques, favorisant la survie cellulaire (PubMed:11238599). Références associées : PMID:11238599
• Se localise principalement sur la membrane plasmique et les projections cellulaires (microvillosités, uropode), mais est également détectée dans le noyau et les corps PML, ce qui suggère des rôles au-delà de la surface cellulaire.
• Fortement exprimée à la surface des thymocytes, des lymphocytes T, des neutrophiles, des plasmocytes et des myélomes, ce qui est cohérent avec ses fonctions spécifiques aux leucocytes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour la cytométrie en flux, réalisez un titrage de l'anticorps pour déterminer la concentration optimale adaptée à votre type cellulaire et vos conditions de coloration spécifiques.
• CD43 est un marqueur de surface ; préparez des suspensions unicellulaires et réalisez une coloration de surface sans fixation / perméabilisation, à moins que des épitopes intracellulaires ne soient ciblés. Notez cependant qu'une partie de la CD43 peut être intracellulaire.
• Utilisez des contrôles d'isotype appropriés et validez avec des contrôles positifs connus (par exemple, splénocytes de souris ou lignées de lymphocytes T) et négatifs (par exemple, cellules déficientes en CD43 ou cellules non hématopoïétiques).
• Prenez en compte que CD43 peut être libérée par clivage ou internalisée après activation ; optimisez le temps et la température de coloration pour mesurer l'expression de surface avec précision.
• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 20-248), garantissant la reconnaissance de la protéine native de surface ; confirmez cependant la réactivité dans votre système modèle.

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