Anticorps monoclonal de lapin anti-CD117/c-Kit de souris conjugué à la PE pour cytométrie en flux - P05532

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit est le récepteur Kit du facteur de croissance des mastocytes et des cellules souches, une tyrosine-protéine kinase codée par le gène Kit chez la souris. Il fonctionne comme récepteur du facteur des cellules souches (KITLG/SCF).
• Après la liaison au SCF, Kit active plusieurs cascades de signalisation, notamment les voies PI3K/AKT1, RAS/MAPK et JAK/STAT, qui régulent la survie, la prolifération et la différenciation cellulaires.
• Kit joue un rôle essentiel dans l’hématopoïèse, le maintien des cellules souches, la gamétogenèse, le développement, la migration et la fonction des mastocytes, ainsi que dans la mélanogenèse.
• Le récepteur est une glycoprotéine transmembranaire dotée de domaines analogues à ceux des immunoglobulines, principalement localisée sur la membrane cellulaire, mais également détectée dans le cytoplasme.
• L’isoforme 1 est largement exprimée, notamment dans le foie fœtal et la moelle osseuse. L’isoforme 3 est enrichie dans les cellules souches hématopoïétiques. Les autres isoformes présentent des profils d’expression spécifiques aux tissus (par exemple, spermatogonies et spermatides).
• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la glycosylation et l’ubiquitination, qui régulent l’activité et le renouvellement de la protéine. Cette protéine est un proto-oncogène et un membre de la famille des récepteurs à activité tyrosine kinase.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps est directement conjugué à la PE, ce qui le rend adapté à une coloration en une étape pour la cytométrie en flux, sans réactif secondaire. Protéger le conjugué de la lumière pendant sa manipulation et son stockage.
• Titrer l’anticorps dans votre système cellulaire spécifique afin de déterminer la concentration optimale pour la cytométrie en flux.
• Envisager un blocage des récepteurs Fc (par exemple avec des anticorps anti-CD16/CD32) afin de minimiser les liaisons non spécifiques lors de la coloration de cellules de souris.
• Inclure un colorant de viabilité afin d’exclure les cellules mortes, susceptibles d’augmenter la coloration de fond.
• L’immunogène couvre le domaine extracellulaire (acides aminés 25–523), ce qui suggère que l’anticorps reconnaît probablement le récepteur de surface natif ; valider la coloration de surface dans votre modèle expérimental.

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