Anticorps monoclonal de lapin anti-Ki67 Humain/Singe conjugué au PE pour la cytométrie en flux intracellulaire - P46013

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ki67

• Ki67 est une grande protéine nucléaire codée par le gène MKI67, largement utilisée comme marqueur de prolifération cellulaire.
• Elle s'associe à la surface des chromosomes mitotiques, agissant comme un répulsif chromosomique pour maintenir la dispersion des chromosomes individuels pendant la mitose précoce.
  Références associées : PMID:27362226, PMID:32879492, PMID:35513709
• Pendant la mitose précoce, Ki67 forme des structures étendues en forme de pinceau qui fournissent une barrière stérique et électrostatique pour empêcher l'effondrement des chromosomes.
  Références associées : PMID:27362226
• En anaphase, la déphosphorylation déclenche un changement fonctionnel : Ki67 devient un attracteur de chromosomes, favorisant le regroupement des chromosomes via une séparation de phases liquide-liquide dépendante de l'ARN.
  Références associées : PMID:28935370, PMID:39153474
• Ki67 se lie à l'ADN, avec une préférence pour l'ADN superenroulé et l'ADN riche en AT, et peut contribuer à l'organisation de la chromatine.
  Références associées : PMID:10878551, PMID:24867636
• Elle se localise dans le noyau et le nucléole pendant l'interphase, et recouvre la surface des chromosomes pendant la mitose.
• La protéine subit diverses modifications post-traductionnelles, notamment phosphorylation, acétylation et ubiquitination, qui régulent ses fonctions mitotiques.
• En tant que produit du gène MKI67, l'expression de Ki67 est étroitement liée à la progression du cycle cellulaire et est absente dans les cellules quiescentes.

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que Ki67 est un antigène nucléaire, la cytométrie en flux intracellulaire nécessite une fixation et une perméabilisation efficaces ; optimisez les étapes de perméabilisation pour votre type cellulaire.
• L'anticorps est produit contre un peptide synthétique de la région C-terminale (aa 2271-2370) ; assurez-vous que cet épitope est présent dans vos cellules ou tissus cibles.
• Utilisez des contrôles isotypiques appropriés et des réglages de compensation pour les anticorps conjugués au PE lors de la cytométrie en flux.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec le singe cynomolgus ; validez son utilisation dans les échantillons de primates non humains pertinents pour la recherche translationnelle.
• Pour les études de prolifération, envisagez une co-marquage avec des colorants de contenu en ADN (par ex., DAPI, Hoechst) ou d'autres marqueurs du cycle cellulaire pour distinguer les phases du cycle.

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