Anticorps monoclonal de lapin anti-CD18 Humain/Singe conjugué à la PE pour la cytométrie en flux - P05107

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Intégrine bêta-2

• L'intégrine bêta-2 (CD18) forme des récepteurs hétérodimériques avec les intégrines alpha (CD11a-d), se liant aux ICAM, iC3b, fibrinogène et VCAM1, régulant l'adhésion et la communication des leucocytes (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:38195629). Références associées : PMID:1676048 | PMID:23775590 | PMID:10438935 | PMID:8777714 | PMID:9841932 | PMID:38195629
• Cette intégrine médie la transmigration des leucocytes et l'adhésion des lymphocytes T/neutrophiles, essentielle pour le trafic des cellules immunitaires et l'inflammation (PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Références associées : PMID:11812992 | PMID:28807980 | PMID:18587400
• Le CD18 participe à la clairance phagocytaire via la reconnaissance de l'ICAM3 sur les neutrophiles apoptotiques et de l'ICAM4 sur les érythrocytes, ainsi qu'à la cytotoxicité des cellules NK (PubMed:23775590, PubMed:16985175, PubMed:15356110). Références associées : PMID:23775590 | PMID:16985175 | PMID:15356110
• L'intégrine β2 agit comme un récepteur de signalisation à la synapse immunologique, où l'engagement LFA-1–ICAM1 couple la stimulation du TCR à la force d'adhésion (PubMed:38195629). Références associées : PMID:38195629
• C'est une glycoprotéine transmembranaire contenant des domaines de type EGF, des sites de liaison calcium/magnésium, et est exprimée sur tous les leucocytes, avec des niveaux élevés sur les neutrophiles ; les mutations causent le déficit d'adhésion leucocytaire de type 1.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre l'ensemble du domaine extracellulaire (aa 1-769) du CD18 humain, suggérant que l'anticorps cible probablement un épitope exposé en surface approprié pour la cytométrie en flux sur cellules vivantes.
• Pour la cytométrie en flux, titrer l'anticorps conjugué à la PE sur les types cellulaires pertinents (par ex., PBMC humaines) pour déterminer la concentration de marquage optimale et minimiser le bruit de fond.
• Inclure un contrôle isotype approprié et une discrimination vivant/mort pour assurer une détection spécifique des leucocytes CD18+.
• Valider la réactivité croisée avec le singe cynomolgus en testant sur des PBMC ou des leucocytes isolés de cette espèce.
• Comme le CD18 est fortement exprimé sur les neutrophiles, pré-bloquer les récepteurs Fc ou utiliser des réactifs de blocage des FcR pour réduire la liaison non spécifique.
• Le marqueur PE permet une détection à laser unique ; veiller aux paramètres de compensation si multiplexage avec d'autres fluorochromes.

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