Anticorps monoclonal de lapin PE anti-CD16 humain/singe pour cytométrie en flux - P08637/O75015

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD16

• CD16, également connu sous le nom de FCGR3, existe sous deux isoformes : FCGR3A (CD16a) et FCGR3B (CD16b), codées par des gènes distincts (FCGR3A et FCGR3B) qui présentent une forte homologie de séquence et assurent la liaison au fragment Fc des IgG. Références associées : PMID:11711607 PMID:21768335 PMID:22023369

• CD16a, exprimé à la surface des cellules NK et des monocytes, déclenche la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) lors de l’engagement de complexes antigène-IgG regroupés, entraînant la lyse des cellules cibles et la production de cytokines, ce qui est essentiel pour l’immunité antivirale et antitumorale. Références associées : PMID:24412922 PMID:25786175 PMID:29967280 PMID:9916693

• La signalisation par CD16a implique la phosphorylation d’adaptateurs contenant des ITAM, activant les voies de la PI3K et des flux calciques ; cela entraîne à la fois la dégranulation et la production de cytokines pro-inflammatoires, avec des réponses de signalisation distinctes selon l’état de phosphorylation du récepteur. Références associées : PMID:1825220 PMID:23024279 PMID:2532305

• CD16a joue un rôle essentiel dans le mécanisme d’action des anticorps monoclonaux thérapeutiques, en renforçant l’ADCC contre les cellules tumorales ; les IgG afucosylées présentent une affinité plus élevée pour CD16a, ce qui entraîne des fonctions effectrices plus puissantes. Références associées : PMID:27670158 PMID:34485821 PMID:28566370

• Lors d’une infection secondaire par le virus de la dengue, CD16a peut induire une facilitation de l’infection dépendante des anticorps (ADE) en favorisant l’entrée du virus dans les cellules myéloïdes par l’intermédiaire de complexes immuns IgG1-virus afucosylés, aggravant ainsi la pathogenèse.

• CD16a est une glycoprotéine transmembranaire principalement localisée sur la membrane cellulaire des cellules NK et d’un sous-ensemble de monocytes circulants ; une forme soluble sécrétée est également produite, contribuant à la diversité de ses fonctions.

• La protéine se caractérise par des domaines de type immunoglobuline, des ponts disulfure et une glycosylation liée à l’azote, essentiels à son intégrité structurelle et à la liaison aux ligands ; la phosphorylation module en outre sa capacité de signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la cytométrie en flux, effectuez une titration de l’anticorps conjugué à la PE afin de déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales spécifiques, en utilisant des PBMC humaines ou des échantillons de macaque cynomolgus comme témoins positifs.
• Incluez des témoins isotopiques appropriés ainsi que des étapes de blocage des récepteurs Fc afin de minimiser les liaisons non spécifiques, en particulier lors de l’analyse de cellules exprimant des récepteurs Fc.
• Le fluorophore PE est brillant et convient à la détection de cibles faiblement abondantes ; tenez compte de sa compatibilité avec les autres fluorophores lors de la conception de panels multicolores et assurez une compensation appropriée.
• Validez les performances de l’anticorps dans l’application prévue, comme les essais rapporteurs d’ADCC ou le profilage des cellules immunitaires, en utilisant des réplicats biologiques et des états d’activation pertinents.
• Cet anticorps peut également être utilisé pour étudier les isoformes de CD16 dans des essais fonctionnels ; sa réactivité croisée avec le macaque cynomolgus facilite les modèles de recherche translationnelle.

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