Anticorps monoclonal PE de lapin anti-CD14 humain/singe pour cytométrie en flux - P08571

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD14

• Le CD14, également appelé antigène de différenciation monocytaire, antigène My23 ou glycoprotéine riche en leucine spécifique des cellules myéloïdes, est un acteur clé de l'immunité innée.
• Il agit comme corécepteur du lipopolysaccharide bactérien (LPS) : il se lie au LPS monomérique avec la LBP et le transmet au complexe LY96/TLR4, médiant ainsi la réponse immunitaire innée contre le LPS bactérien. Références associées : PMID:1698311 PMID:23264655 PMID:20133493 PMID:22265692
• La signalisation en aval passe par MyD88, TIRAP et TRAF6, conduisant à l'activation de NF-kappa-B, la sécrétion de cytokines et la réponse inflammatoire. Références associées : PMID:8612135
• Le CD14 fonctionne également comme corécepteur des hétérodimères TLR2:TLR6 et TLR2:TLR1 en réponse aux lipopeptides diacylés et triacylés ; ces clusters déclenchent une signalisation à la surface cellulaire puis un trafic dépendant des radeaux lipidiques vers l'appareil de Golgi. Références associées : PMID:16880211
• De plus, le CD14 se lie au LDL électronégatif (LDL(-)) et médie la libération de cytokines induite par le LDL(-), reliant l'immunité innée au métabolisme lipidique. Références associées : PMID:23880187
• Au niveau subcellulaire, le CD14 est situé sur la membrane cellulaire, les radeaux membranaires et l'appareil de Golgi, et est également présent sous forme de protéine sécrétée. C'est une glycoprotéine à répétitions riches en leucine (LRR) ancrée par GPI.
• Spécificité tissulaire : le CD14 est fortement exprimé à la surface des monocytes et faiblement sur les granulocytes ; il est détecté sur les macrophages et la plupart des macrophages tissulaires. Références associées : PMID:1698311

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend le domaine extracellulaire (acides aminés 20-352) du CD14 humain, ce qui suggère que l'anticorps reconnaît probablement la conformation native du récepteur. Validez la coloration dans votre système d'échantillon correspondant à l'aide de contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Pour la cytométrie en flux, réalisez une titration de l'anticorps conjugué à la PE pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type cellulaire d'intérêt. Utilisez un contrôle d'isotype pour évaluer la liaison non spécifique.
• La réactivité croisée avec le CD14 du singe cynomolgue a été démontrée ; si vous utilisez d'autres espèces, vérifiez la réactivité indépendamment.
• Évitez une exposition prolongée à la lumière lorsque vous travaillez avec le conjugué PE pour préserver l'intégrité du signal.

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