Anticorps monoclonal de lapin anti-TNF-α humain conjugué à la PE pour cytométrie en flux (intra) - P01375

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du facteur de nécrose tumorale

• Le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α), codé par le gène TNF sur le chromosome 6 humain, est une cytokine pro-inflammatoire essentielle et un membre de la superfamille des ligands du TNF (TNFSF2).
• Il est produit sous forme de protéine transmembranaire de type II et libéré sous forme d’homotrimère soluble après clivage, principalement par les macrophages activés.
• Le TNF-α se lie à TNFRSF1A/TNFR1 et TNFRSF1B/TNFBR, déclenchant des voies de signalisation pouvant entraîner l’apoptose, la nécroptose ou l’activation de gènes pro-inflammatoires.
• Il constitue un pyrogène puissant et un inducteur de la cachexie et, dans certaines conditions, peut stimuler la prolifération et la différenciation cellulaires.
• Le TNF-α favorise l’ostéoclastogenèse et la résorption osseuse, contribuant à la perte osseuse dans les maladies inflammatoires.
• Le TNF-α favorise l’angiogenèse en induisant de manière synergique la production de VEGF avec IL1B et IL6. Références associées : PMID:12794819
• Dans la polyarthrite rhumatoïde, le TNF-α altère la fonction des lymphocytes T régulateurs via la déphosphorylation de FOXP3 due à la surexpression de PP1. Références associées : PMID:23396208
• Il agit comme un médiateur essentiel de la mort cellulaire dans l’action anticancéreuse de neutrophiles stimulés par le BCG, associés à un mimétique de DIABLO/SMAC dans les cellules cancéreuses de la vessie. Références associées : PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• La forme du domaine intracellulaire (ICD) du TNF-α peut induire la production d’IL-12 dans les cellules dendritiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire soluble (aa 77-233) du TNF-α humain, ce qui suggère une reconnaissance à la fois du précurseur lié à la membrane et de la forme mature sécrétée.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation des cellules afin de garantir une détection précise du TNF-α cytoplasmique, car cette protéine est principalement sécrétée.
• Incluez des contrôles isotopiques et des contrôles non stimulés appropriés afin de distinguer la coloration spécifique du bruit de fond, en particulier dans les cellules immunitaires activées.
• Validez les performances de l’anticorps dans votre type cellulaire et vos conditions d’activation spécifiques, car les niveaux d’expression du TNF-α peuvent varier.

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