Anticorps monoclonal de lapin anti-TLR3 humain conjugué PE pour cytométrie en flux (intracellulaire) - O15455

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de TLR3

• Le récepteur Toll-like 3 (TLR3), également connu sous le nom de CD283, est une protéine membranaire de type I à un seul passage transmembranaire, appartenant à la famille des récepteurs Toll-like de reconnaissance des motifs moléculaires.
• Il agit comme un capteur clé de l’ARN viral double brin (ARNdb), déclenchant des réponses immunitaires innées via la voie de l’adaptateur TRIF/TICAM1, ce qui entraîne l’activation de NF-κB et la translocation nucléaire d’IRF3, suivies de la production de cytokines pro-inflammatoires et d’interférons de type I.
• La protéine contient un domaine extracellulaire riche en leucines (LRR) responsable de la reconnaissance du ligand, une hélice transmembranaire et un domaine cytoplasmique TIR (Toll/récepteur de l’interleukine-1) essentiel à la signalisation en aval.
• Elle se localise principalement au niveau de la membrane du réticulum endoplasmique et dans les compartiments endosomaux (notamment les endosomes précoces), où elle rencontre l’ARNdb viral internalisé.
• TLR3 est fortement exprimé dans le placenta et le pancréas, et constitue le TLR le plus fortement exprimé dans le cerveau, notamment dans les astrocytes, les cellules gliales et les neurones. Il est également présent dans les cellules dendritiques immatures CD11c+.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l’azote, la phosphorylation, la formation de ponts disulfure et l’ubiquitination (liaison isopeptidique) — toutes contribuant à la stabilité, au transport et à la capacité de signalisation du récepteur.
• L’épissage alternatif produit plusieurs isoformes, et des variants génétiques de TLR3 ont été associés à une susceptibilité à certaines maladies, notamment des troubles immunitaires et neurologiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps a été produit contre un fragment recombinant correspondant au domaine extracellulaire (aa 24-339). Pour la cytométrie en flux intracellulaire, veillez à appliquer des protocoles appropriés de fixation et de perméabilisation des cellules afin de permettre à l’anticorps d’accéder à la protéine cible.
• Envisagez de titrer l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour votre configuration expérimentale spécifique, car l’efficacité du marquage peut varier selon le type cellulaire et la méthode de fixation.
• Utilisez des contrôles biologiques appropriés (par exemple, des cellules non stimulées et des cellules stimulées par du poly(I:C)) ainsi que des contrôles isotopiques afin de vérifier la spécificité du marquage.

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