Anticorps monoclonal PE lapin anti-TIGIT humain pour cytométrie en flux - Q495A1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de TIGIT

• TIGIT (immunorécepteur des lymphocytes T avec domaines Ig et ITIM) est un récepteur inhibiteur de la superfamille des immunoglobulines, également appelé VSIG9 et VSTM3, qui module les réponses immunitaires principalement en supprimant l'activation des lymphocytes T en favorisant les cellules dendritiques immunorégulatrices matures. Références associées : PMID:19011627
• Il se lie avec haute affinité au récepteur du poliovirus PVR/CD155 et à la nectine-2/CD112 sur les cellules présentatrices d'antigènes, délivrant des signaux inhibiteurs aux lymphocytes T et aux cellules NK ; l'engagement du ligand déclenche la phosphorylation de sa queue cytoplasmique par les kinases Src FYN ou LCK, recrutant GRB2 et la phosphatase SHIP1 pour atténuer les voies PI3K et MAPK. Références associées : PMID:23154388
• De plus, TIGIT s'associe à la β-arrestine-2/ARRB2 pour recruter SHIP1, qui supprime l'auto-ubiquitination de TRAF6 et inhibe par conséquent la cascade de signalisation NF-κB. Références associées : PMID:24817116
• Il agit également comme récepteur fonctionnel de la nectine-4 pour inhiber la cytotoxicité des cellules NK, élargissant son répertoire de points de contrôle immunitaires. Références associées : PMID:32503945
• Au niveau protéique, TIGIT est exprimé à faible taux sur les lymphocytes T CD4+ mémoires périphériques et régulateurs ainsi que sur les cellules NK, et son expression est nettement augmentée après activation de ces cellules.
• Au niveau sous-cellulaire, il se localise sur la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire de type I à passage unique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la formation de ponts disulfures et la phosphorylation, qui sont essentielles à ses fonctions de signalisation.
• L'épissage alternatif génère des isoformes du récepteur, et la protéine est membre du protéome de référence avec une masse moléculaire calculée d'environ 26,3 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps monoclonal de lapin conjugué à la PE est conçu pour la détection directe par cytométrie en flux (FC) du TIGIT humain sur cellules vivantes ; aucune coloration secondaire n'est nécessaire.
• L'immunogène recombinant couvrant le domaine extracellulaire (acides aminés 22–141), l'anticorps reconnaît probablement un épitope dans la région de liaison au ligand ; envisagez de réaliser des expériences de blocage avec PVR/CD155 ou la nectine-2 pour confirmer la spécificité.
• Étant donné que l'expression de TIGIT est faible sur les cellules au repos et augmente après activation, incluez une étape d'activation appropriée (par exemple, stimulation par anti-CD3/CD28 pour les lymphocytes T ou IL-2 pour les cellules NK) pour maximiser le signal.
• Réalisez un titrage de l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type de cellule et vos conditions d'essai spécifiques, et incluez toujours des contrôles d'isotype appropriés.

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