Anticorps monoclonal de lapin anti-humain Siglec-7/CD328 conjugué à la PE pour la cytométrie en flux - Q9Y286

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Siglec-7

• La lectine de type immunoglobuline liant l'acide sialique 7 (Siglec-7), également connue sous les noms CD328, AIRM-1, p75 et D-siglec, est codée par le gène SIGLEC7. C'est une protéine membranaire de type I à passage unique appartenant à la superfamille des immunoglobulines.
• Elle fonctionne comme une molécule d'adhésion putative qui médie une liaison dépendante de l'acide sialique aux cellules, avec une préférence pour les acides sialiques liés en α-2,3 et α-2,6 et les disialogangliosides. Le site de reconnaissance de l'acide sialique peut être masqué par des interactions en cis à la surface de la même cellule.
• Agit comme un récepteur inhibiteur dans la réponse immunitaire : lors de la liaison à son ligand, elle subit une phosphorylation de tyrosine et recrute des phosphatases cytoplasmiques (par exemple, SHP-1, SHP-2) via des domaines SH2, conduisant à la déphosphorylation des molécules de signalisation et à l'atténuation de l'activation des cellules immunitaires.
• Médie l'inhibition de la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (NK), jouant un rôle crucial dans la régulation de la fonction des cellules NK et de l'immunité innée.
• Impliquée dans l'hématopoïèse ; il a été démontré qu'elle inhibe la différenciation des précurseurs de cellules CD34+ vers la lignée myélomonocytaire et supprime la prolifération des cellules myéloïdes leucémiques in vitro.
• Exprimée principalement sur les cellules NK au repos et activées, avec des niveaux plus faibles sur les granulocytes et les monocytes. Une expression élevée est observée dans le placenta, le foie, les poumons, la rate et les leucocytes du sang périphérique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la phosphorylation. Contient un peptide signal, une région extracellulaire avec deux domaines de type Ig (un de type V, un de type C2), une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique avec des motifs ITIM et de type ITIM.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Puisque l'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 18-144), l'anticorps reconnaît probablement un épitope dans la région N-terminale, ce qui le rend adapté à la détection du Siglec-7 natif de surface.
• Cet anticorps conjugué à la PE est destiné à la cytométrie en flux directe ; la dilution de travail optimale doit être déterminée expérimentalement par titrage dans le système cellulaire pertinent (par exemple, PBMC humains ou lignées de cellules NK).
• Envisagez d'inclure des contrôles d'isotype appropriés et un blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Pour les panels de cytométrie en flux multicolores combinés, vérifiez que le conjugué PE est compatible avec les autres fluorophores et effectuez une compensation appropriée.

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