Anticorps monoclonal de lapin anti-Podoplanine humaine conjugué à la PE pour cytométrie en flux - Q86YL7

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Podoplanine

• La podoplanine (PDPN), également connue sous le nom d'Aggrus, Gp36 et T1-alpha, est une glycoprotéine transmembranaire fortement O-glycosylée qui joue des rôles critiques dans l'adhésion cellulaire, la migration et la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM).
• Au cours du développement, la PDPN médie la séparation des vaisseaux sanguins et lymphatiques en se liant au CLEC1B sur les plaquettes, déclenchant l'activation et l'agrégation plaquettaires. Références connexes : PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411
• L'interaction avec CD9 atténue l'agrégation plaquettaire induite par la PDPN, soulignant un mécanisme régulateur dans la thrombose. Références connexes : PMID:18541721
• Par la liaison à MSN ou EZR, la PDPN favorise la TEM en déclenchant l'activation de RHOA, ce qui améliore la migration et l'invasivité des cellules tumorales. Références connexes : PMID:17046996 PMID:21376833
• La PDPN interagit avec CD44 pour stimuler la migration cellulaire directionnelle dans les contextes épithéliaux normaux et tumoraux. Références connexes : PMID:20962267
• Dans les kératinocytes, la PDPN induit des changements morphologiques drastiques, notamment une forme allongée, des protrusions membranaires et une motilité accrue, tout en réduisant l'adhésion cellulaire. Références connexes : PMID:15515019
• La PDPN contrôle la stabilité des invadopodes et la dégradation de la matrice extracellulaire (MEC) dans les cellules tumorales via l'axe de signalisation RHOC-ROCK-LIMK-CFL1, facilitant la métastase. Références connexes : PMID:25486435
• La PDPN se localise dans des sous-domaines membranaires spécifiques tels que les lamellipodes, les filopodes, les microvillosités, les ruffles et les radeaux membranaires, et se trouve également dans le cytoplasme ; elle est fortement exprimée dans le placenta, le poumon et le muscle squelettique, avec une faible expression dans le cerveau, le rein et le foie, et est régulée à la hausse dans les carcinomes colorectaux et les carcinomes épidermoïdes oraux. La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 17 kDa mais migre à 36–43 kDa en raison d'une glycosylation extensive et d'une modification par l'acide sialique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 21–123), suggérant que l'anticorps reconnaît l'épitope de surface natif ; il est bien adapté pour la détection par cytométrie en flux (FC) de la PDPN sur des cellules vivantes.
• Puisque cet anticorps est directement conjugué à la phycoérythrine (PE), une titration est recommandée pour déterminer la concentration de coloration optimale sans avoir besoin d'un anticorps secondaire.
• Incluez des échantillons de témoins non colorés et de témoins d'isotype appropriés pour définir les gates et évaluer la fluorescence de fond dans les expériences de FC.
• Validez les performances de l'anticorps dans des lignées cellulaires connues pour exprimer la PDPN (par exemple, des cellules pulmonaires ou placentaires) et envisagez d'utiliser des cellules surexprimant la PDPN comme témoin positif.

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