Anticorps monoclonal de lapin anti-LGR5 (GPR49) humain conjugué à la PE pour cytométrie en flux - O75473

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de LGR5

• LGR5, également connu sous les noms GPR49, GPR67 et HG38, est un récepteur couplé aux protéines G contenant des répétitions riches en leucine, qui agit comme récepteur des R-spondines.
• Il potentialise la voie de signalisation canonique Wnt en s’associant à LRP6 phosphorylé et aux récepteurs Frizzled lors de la liaison aux R-spondines, augmentant ainsi l’expression des gènes cibles.
• Contrairement aux récepteurs couplés aux protéines G classiques, LGR5 n’active pas les protéines G hétérotrimériques pour transduire les signaux.
• LGR5 est un marqueur bien établi des cellules souches de l’épithélium intestinal et du follicule pileux. Il joue un rôle essentiel dans le développement et le maintien des cellules souches intestinales adultes au cours du développement postembryonnaire.
• Au niveau subcellulaire, LGR5 se localise à la membrane cellulaire, dans l’appareil de Golgi et dans la membrane du réseau trans-Golgi.
• Il est exprimé dans les muscles squelettiques, le placenta, la moelle épinière et certaines régions du cerveau, ainsi que spécifiquement à la base des cryptes des cellules souches de la muqueuse colique et de l’intestin grêle ; une surexpression est observée dans les cancers de l’ovaire, du côlon et du foie.
• La protéine est soumise à un épissage alternatif et présente des caractéristiques structurales clés telles que des ponts disulfure, une nature glycoprotéique, des répétitions riches en leucine et sept hélices transmembranaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à une région intracellulaire C-terminale (acides aminés 480 à 580), potentiellement adaptée à la détection de l’expression totale de LGR5 ; vérifiez l’accessibilité de l’épitope dans votre protocole de cytométrie en flux.
• Pour la cytométrie en flux, veillez à assurer une perméabilisation cellulaire appropriée si vous ciblez des épitopes intracellulaires, ou utilisez des protocoles de marquage de surface si l’épitope est exposé à la surface.
• Validez les performances de l’anticorps dans des types cellulaires pertinents connus pour exprimer LGR5, tels que les organoïdes intestinaux, les lignées cellulaires de cancer colorectal ou les cellules des follicules pileux, et incluez des contrôles positifs et négatifs.
• Compte tenu de la faible expression de LGR5 dans certaines populations de cellules souches, envisagez des stratégies d’amplification du signal ou l’utilisation de contrôles à base de protéines recombinantes afin d’optimiser la détection.

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