Anticorps monoclonal de lapin anti-IFN-gamma humain conjugué à la PE pour cytométrie en flux intracellulaire - P01579

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'interféron gamma

• L'interféron gamma (IFN-gamma) est un interféron de type II produit par des cellules immunitaires, notamment les lymphocytes T activés et les cellules NK, qui coordonne les réponses immunitaires antimicrobiennes, antivirales et antitumorales (PubMed:16914093, PubMed:8666937). Références associées : PMID:16914093 PMID:8666937

• La liaison de l'IFNG à son récepteur IFNGR1 déclenche la cascade de signalisation JAK-STAT, entraînant l'activation de STAT1, sa translocation nucléaire et la régulation transcriptionnelle des gènes cibles (PubMed:8349687). Références associées : PMID:8349687

• Il joue un rôle essentiel dans la voie de présentation des antigènes de classe I en induisant le remplacement des sous-unités constitutives du protéasome par des sous-unités de l'immunoprotéasome et en augmentant l'expression de l'activateur du protéasome PA28, améliorant ainsi la génération de peptides destinés au chargement du CMH I (PubMed:8666937, PubMed:8163024, PubMed:11112687). Références associées : PMID:8666937 PMID:8163024 PMID:11112687

• L'IFN-gamma augmente l'expression des complexes du CMH II à la surface cellulaire en induisant l'expression des cathepsines B, H et L (PubMed:7729559). Références associées : PMID:7729559

• De nombreux gènes précoces induits par l'IFN-gamma sont des facteurs de transcription tels qu'IRF1, qui amplifient ensuite la réponse transcriptionnelle (PubMed:16914093). Références associées : PMID:16914093

• L'IFN-gamma participe également à la régulation des cellules souches hématopoïétiques, en influençant leur développement, leur quiescence et leur différenciation au cours de l'homéostasie (par similarité).

• La protéine est sécrétée et subit des modifications post-traductionnelles ; les principales modifications comprennent la glycosylation, le clivage au niveau des résidus basiques et la formation d'acide pyrrolidone carboxylique, avec un poids moléculaire d'environ 19 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Ce anticorps monoclonal conjugué à la PE est prêt à l'emploi pour la cytométrie en flux intracellulaire. Il convient d'envisager une stimulation appropriée (par exemple, PMA/ionomycine) ainsi que des protocoles de fixation et de perméabilisation adaptés pour détecter l'IFN-gamma dans les lymphocytes T humains ou les cellules NK activés.
• La dilution de travail optimale doit être déterminée expérimentalement par l'utilisateur final ; un point de départ généralement utilisé en cytométrie en flux est de 0,5 à 5 µL par test, mais une titration est recommandée.
• La réactivité croisée est limitée à l'humain ; en cas d'utilisation d'échantillons de primates non humains, il convient de valider indépendamment la réactivité croisée en raison de différences épitopiques potentielles.
• Réservé à la recherche ; ce produit n'a pas encore été validé pour les applications diagnostiques ou cliniques ; les développeurs de tests diagnostiques commerciaux doivent réaliser leurs propres études de performance et de stabilité.

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