Anticorps monoclonal de lapin anti-CD8b humain conjugué à la PE pour la cytométrie en flux - P10966

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD8b

• Le CD8b, également appelé chaîne bêta du CD8, est une glycoprotéine de surface des lymphocytes T appartenant à la superfamille des immunoglobulines. Il existe sous plusieurs isoformes (isoforme 1, 3, 5, 6, 7, 8) générées par épissage alternatif.
• Le CD8b forme des hétérodimères avec la chaîne alpha du CD8 et agit comme un corécepteur pour les complexes CMH de classe I:peptide sur les cellules présentatrices d'antigènes.
• Lors de la liaison au CMH de classe I, le CD8b recrute la kinase Src LCK vers le complexe TCR-CD3, initiant des cascades de signalisation intracellulaires qui favorisent l'activation, la prolifération et la fonction cytotoxique des lymphocytes T.
• L'extrémité cytoplasmique du CD8b contient un site de palmitoylation qui cible la protéine vers les radeaux lipidiques, concentrant les molécules de signalisation et améliorant l'efficacité de la transduction du signal.
• Le CD8b est essentiel pour la sélection thymique des lymphocytes T CD8+, assurant un développement approprié du répertoire des lymphocytes T cytotoxiques.
• Au niveau subcellulaire, le CD8b se localise principalement à la membrane plasmique, mais des isoformes sécrétées ont également été détectées.
• L'expression tissulaire est restreinte au thymus et aux lymphocytes T CD8+ périphériques, certaines isoformes montrant une expression préférentielle dans les populations thymiques par rapport aux populations périphériques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation, qui peuvent réguler la stabilité de la protéine et ses propriétés d'interaction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène a été conçu contre le domaine extracellulaire (aa 22-170) du CD8b humain, englobant le domaine de type V immunoglobuline-like crucial pour l'interaction avec le CMH I, ce qui le rend approprié pour détecter le CD8b exprimé en surface par cytométrie en flux.
• Cet anticorps étant validé pour la cytométrie en flux, envisagez de l'utiliser pour l'immunophénotypage des sous-populations de lymphocytes T, mais effectuez des expériences de titrage pour déterminer la concentration optimale.
• L'anticorps étant directement conjugué à la PE (phycoérythrine), assurez des réglages de compensation appropriés dans les panels de cytométrie en flux multicolores, en particulier lors d'une co-marquage avec le FITC ou l'APC.
• Pour d'autres applications comme le Western blot ou l'immunohistochimie, l'anticorps pourrait nécessiter une re-validation, car le conjugué PE et la reconnaissance de l'antigène peuvent se comporter différemment.
• Utilisez des contrôles isotypiques appropriés et des colorants de viabilité dans les expériences de cytométrie en flux pour distinguer le marquage spécifique du CD8b du bruit de fond.

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