Anticorps monoclonal PE PolymAb® lapin anti-humain CD8 pour FC - P01732 / P10966

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD8

• Le gène CD8A code pour la chaîne alpha de la glycoprotéine CD8 de surface des lymphocytes T, également appelée antigène de différenciation des lymphocytes T T8/Leu-2.
• CD8 agit comme corécepteur glycoprotéique membranaire intégral pour les molécules du CMH de classe I, se liant simultanément au récepteur des cellules T (TCR) et au complexe CMH de classe I:peptide sur les cellules présentatrices d'antigènes.
• Lors de son interaction avec le CMH de classe I, CD8 recrute la kinase Src LCK sur le complexe TCR-CD3, initiant une signalisation intracellulaire qui favorise l'activation des lymphocytes, la production de cytokines et les fonctions effectrices des lymphocytes T cytotoxiques (CTL).
• CD8A est exprimé sur les lymphocytes T dérivés du thymus principalement sous forme d'hétérodimère lié par des ponts disulfures avec CD8B, mais peut également former des homodimères CD8A sur des sous-populations de cellules tueuses naturelles (NK), de lymphocytes T mémoires, de lymphocytes intraépithéliaux, de monocytes et de cellules dendritiques.
• L'homodimère CD8A sur les cellules NK soutient un mécanisme de survie qui facilite la conjugaison et la lyse de plusieurs cellules cibles, et favorise également la différenciation des lymphocytes activés en lymphocytes T CD8 mémoires.
• CD8A est localisé sur la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire de type I à passage unique ; une forme secrétée a également été identifiée.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent l'épissage alternatif, la formation de ponts disulfures, la glycosylation N-liée et la palmitoylation sur un résidu cystéine proche de la membrane, qui sont essentiels à sa structure et sa fonction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour l'analyse en cytométrie en flux, titrez l'anticorps afin de déterminer la dilution de travail optimale pour votre système expérimental et votre type cellulaire spécifique.
• Utilisez des contrôles d'isotype appropriés et des contrôles fluorescence moins un (FMO) pour évaluer le bruit de fond et définir correctement le phénotypage.
• Protégez l'anticorps conjugué à la PE de la lumière pendant la manipulation et le stockage pour éviter le photoblanchiment.
• Cet anticorps détecte à la fois les chaînes CD8A et CD8B ; évaluez sa pertinence pour l'identification des sous-populations de lymphocytes T CD8+ et d'autres populations exprimant CD8 telles que les cellules NK et les cellules dendritiques dans les cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC).
• Réalisez la marquage de surface sur cellules vivantes dans des conditions standard ; évitez la fixation avant marquage si possible, car un masquage des épitopes peut se produire.

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