Anticorps monoclonal de lapin anti-CD62E/E-sélectine humaine conjugué à la PE pour FC - P16581

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'E-sélectine

• L'E-sélectine, également connue sous les noms de CD62E, molécule d'adhésion des leucocytes endothéliaux 1 (ELAM-1) et molécule d'adhésion des leucocytes aux cellules endothéliales 2 (LECAM2), est une glycoprotéine de surface cellulaire codée par le gène SELE (GeneID : 6401).
• Elle assure l'adhésion des neutrophiles sanguins à l'endothélium activé par les cytokines par interaction avec SELPLG/PSGL1, jouant ainsi un rôle central dans l'immunoadhésion et le recrutement des leucocytes au cours de l'inflammation.
• La protéine contient un domaine lectine de type C en N-terminal, un domaine similaire à l'EGF et plusieurs domaines de répétitions consensus courtes (sushi), caractéristiques des sélectines, et nécessite du calcium pour fonctionner.
• Il s'agit d'une protéine transmembranaire localisée au niveau de la membrane cellulaire, dont les domaines extracellulaires sont stabilisés par des ponts disulfure et qui est ancrée à la surface par une unique hélice transmembranaire.
• L'E-sélectine pourrait également contribuer à la morphogenèse capillaire, ce qui suggère des fonctions plus larges dans la biologie vasculaire au-delà du trafic des cellules immunitaires.
• La protéine mature possède un poids moléculaire approximatif de 66 kDa (UniProt : P16581), ce qui est conforme aux spécifications du produit.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 22 à 230 de l'E-sélectine humaine, englobant les domaines extracellulaires lectine et similaires à l'EGF, qui sont essentiels à la liaison au ligand ; cette conception favorise la spécificité pour le récepteur natif.
• Pour la cytométrie en flux, il est recommandé d'utiliser des cellules endothéliales humaines activées, par exemple des HUVEC stimulées par le TNF-α ou l'IL-1β, comme contrôle positif, et de valider la spécificité de liaison avec des peptides bloquants appropriés ou des contrôles d'isotype.
• Le conjugué PE permet une coloration directe en une seule étape, réduisant au minimum le bruit de fond et la durée de la procédure ; effectuez un titrage de l'anticorps afin d'optimiser le rapport signal/bruit pour votre système cellulaire.
• Confirmez l'expression de la cible de 66 kDa dans votre échantillon en vous référant à l'entrée SWISS-PROT P16581, et envisagez une vérification du poids moléculaire en cas de passage à des analyses par western blot.

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