Anticorps monoclonal de lapin anti-CD48 humain conjugué à la PE pour la cytométrie en flux - P09326

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD48

• Le CD48, également connu sous le nom de SLAMF2 ou BLAST-1, est une glycoprotéine de surface cellulaire ancrée par glycosylphosphatidylinositol (GPI) appartenant à la famille des molécules d'activation lymphocytaire signalisatrices (SLAM). Il présente une région extracellulaire avec deux domaines de type immunoglobuline et une ancre GPI, et un épissage alternatif produit de multiples isoformes.
• Le CD48 interagit via son domaine immunoglobuline N-terminal avec les récepteurs de surface cellulaire CD244/2B4 ou CD2 pour réguler la fonction et l'activation des cellules immunitaires. Références associées : PMID:12007789, PMID:19494291, PMID:27249817
• Il médie la transduction du signal des cellules T en s'associant au CD2 et en amenant efficacement la protéine kinase de la famille Src LCK et LAT au complexe TCR/CD3, favorisant ainsi la phosphorylation de LCK. Références associées : PMID:12007789, PMID:19494291
• Lors de la liaison au CD244, le CD48 induit la phosphorylation des motifs ITSM (immunoreceptor tyrosine-based switch motifs) cytoplasmiques du CD244, initiant des événements de signalisation qui conduisent à la formation de la synapse immunologique et à la libération dirigée de granules cytolytiques par les lymphocytes T et les cellules NK. Références associées : PMID:27249817
• Le CD48 est localisé à la membrane cellulaire et dans les radeaux membranaires ; une forme sécrétée existe également, résultant probablement du clivage de l'ancre GPI ou d'un épissage alternatif.
• Il est largement exprimé sur toutes les cellules hématopoïétiques, y compris les lymphocytes, les monocytes et les cellules dendritiques.
• La protéine contient des domaines immunoglobulines conservés et des ponts disulfure, et est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant la N-glycosylation et l'ancrage GPI.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour les applications de cytométrie en flux, titrez cet anticorps conjugué à la PE pour déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire et vos conditions expérimentales.
• Étant donné que le CD48 est une protéine de surface ancrée par GPI, un marquage de surface sur cellules vivantes est généralement suffisant ; évitez la perméabilisation sauf si une détection intracellulaire est spécifiquement requise.
• Sur la base de la conception de l'immunogène (domaine extracellulaire, acides aminés 27–220), l'anticorps est censé reconnaître la conformation native du CD48 ; validez-le dans le système d'échantillon pertinent, tel que les cellules mononucléées du sang périphérique humain (PBMC) ou les lignées cellulaires hématopoïétiques.
• Envisagez d'utiliser une étape de blocage appropriée des récepteurs Fc pour réduire la liaison non spécifique, en particulier lorsque vous travaillez avec des cellules myéloïdes.
• Compte tenu de l'expression généralisée du CD48 sur les cellules hématopoïétiques, concevez des stratégies de gating appropriées et incluez des contrôles isotypiques pour différencier le marquage spécifique.

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