Anticorps monoclonal de Lapin anti-Humain CD361 conjugué à la PE pour FC - P34910

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'EVI2B / CD361

• Encodé par le gène EVI2B, le CD361 est une glycoprotéine transmembranaire également connue sous le nom d'homologue de la protéine du site d'intégration virale écotope 2B, avec un épissage alternatif générant plusieurs isoformes.
• Joue un rôle essentiel dans la différenciation des granulocytes et la fonctionnalité des cellules progénitrices hématopoïétiques, influençant la progression du cycle cellulaire et la survie.
• Se localise à la membrane en tant que protéine à hélice transmembranaire à passage unique, cohérent avec son implication dans la signalisation extracellulaire ou l'adhésion.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa stabilité, sa localisation ou ses fonctions de signalisation.
• Classé comme proto-oncogène ; sa dysrégulation est liée aux malignités hématopoïétiques, bien que les mécanismes oncogènes précis restent à l'étude.
• Largement exprimé dans la moelle osseuse, les cellules mononucléaires du sang périphérique, les fibroblastes et les lignées lymphoblastoïdes transformées par l'EBV ; montre une forte expression dans les cellules granulocytaires et une expression plus faible sur les lymphocytes.
• Contient un peptide signal pour le ciblage vers la voie sécrétoire et possède un domaine transmembranaire requis pour l'ancrage à la membrane.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région extracellulaire (acides aminés 22–199) du CD361, rendant cet anticorps bien adapté pour la détection de la protéine exprimée en surface dans des essais de cytométrie en flux sur cellules vivantes.
• Pour la FC, envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type de cellule spécifique et votre configuration expérimentale ; une plage de départ de 0,5 à 5 µg par million de cellules est souvent utile pour les anticorps conjugués.
• Validez l'anticorps dans le système d'échantillons pertinent (par exemple, PBMC humains, lignées cellulaires granulocytaires) et incluez des témoins appropriés, tels que des cellules non colorées et des anticorps conjugués à la PE de même isotype, pour assurer la spécificité.
• Comme l'expression du CD361 est la plus forte dans les granulocytes, le pré-triage sur les marqueurs granulocytaires ou l'utilisation d'une centrifugation sur gradient de densité pour enrichir les granulocytes peut améliorer la résolution du signal.
• Les conditions de préparation des échantillons (par exemple, fixation, perméabilisation) doivent être optimisées pour le marquage de surface si la viabilité est affectée, bien que le marquage sur cellules vivantes soit recommandé pour cet anticorps dirigé contre le domaine extracellulaire.

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