Anticorps monoclonal de lapin anti-CD301/CLEC10A humain marqué PE pour cytométrie en flux - Q8IUN9

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CLEC10A/CD301

• CLEC10A, également désigné CD301, MGL (lectine de type galactose des macrophages), HML et CLECSF14, est un récepteur de type lectine C transmembranaire de type II exprimé sur les cellules myéloïdes présentatrices d’antigènes, telles que les cellules dendritiques des ganglions lymphatiques, de la peau et des tissus dermiques.
• La protéine reconnaît spécifiquement les résidus de N-acétylgalactosamine (GalNAc) liés en α et en β sur les antigènes glycoprotéiques et glycolipidiques, notamment les antigènes Tn, T, LacdiNAc et les gangliosides GM2/GD2, de manière dépendante du Ca²⁺. Références associées : PMID:15802303, PMID:16998493, PMID:17616966, PMID:23507963
• Au niveau de la synapse immunologique entre les cellules présentatrices d’antigènes et les cellules T, CD301 se lie à CD45 décoré de Tn sur les cellules T effectrices, modulant son activité phosphatasique afin de réguler l’activation des cellules T, la production de cytokines et la prolifération. Références associées : PMID:15802303, PMID:16998493, PMID:22213806
• La ligation de CD301 favorise un phénotype de cellule dendritique tolérogène, propice à la génération de cellules T régulatrices immunosuppressives. Références associées : PMID:15802303, PMID:16998493, PMID:22213806
• CD301 agit également comme un récepteur endocytaire de reconnaissance des motifs : après sa liaison à l’antigène Tn présent sur les mucines tumorales, il assure l’internalisation des antigènes dans la voie endolysosomale, facilitant leur présentation croisée aux cellules T CD8⁺ et CD4⁺ et contribuant à l’immunité antitumorale. Références associées : PMID:15802303, PMID:17616966, PMID:17804752
• Au niveau subcellulaire, CLEC10A se localise sur la membrane cellulaire et, après engagement du ligand, est transporté vers les endosomes précoces et les lysosomes.
• La protéine est N-glycosylée et subit un épissage alternatif générant des isoformes pouvant différer par leurs propriétés de liaison aux ligands.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps conjugué au PE est optimisé pour la cytométrie en flux ; veiller à effectuer un blocage approprié des récepteurs Fc afin de réduire au minimum la liaison non spécifique aux cellules myéloïdes.
• Pour l’immunophénotypage des cellules dendritiques, l’associer à des marqueurs de lignée (par exemple, CD11c et HLA-DR) et utiliser des contrôles de compensation appropriés pour la fluorescence du PE.
• L’immunogène englobe le domaine extracellulaire de type lectine C (aa 61–316), ce qui suggère une réactivité avec le récepteur natif correctement replié ; valider les performances sur des PBMC humaines primaires ou des cellules dendritiques dérivées de tissus.
• Comme CLEC10A est exprimé dans les endosomes précoces et les lysosomes après endocytose, la coloration intracellulaire peut nécessiter une optimisation de la perméabilisation si l’on cible les réservoirs de récepteurs internalisés.

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