Ac anti-CD170/Siglec-5 humain de lapin conjugué à la PE - O15389

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD170/Siglec-5

• Le gène SIGLEC5 code la lectine 5 de type Ig se liant à l'acide sialique, également connue sous les noms de CD170, antigène CD33-like 2 (CD33L2) et protéine 2 se liant à l'obésité (OB-BP2).
• Il agit comme une molécule d'adhésion putative qui médie la liaison dépendante de l'acide sialique aux cellules, en reconnaissant avec une affinité équivalente les acides sialiques liés en alpha-2,3 et en alpha-2,6.
• Le site de reconnaissance de l'acide sialique peut être masqué par des interactions en cis avec les acides sialiques présents à la surface de la même cellule, ce qui pourrait réguler sa fonction d'adhésion.
• SIGLEC5 appartient à la famille des lectines de type immunoglobuline se liant à l'acide sialique (SIGLEC), caractérisées par un domaine Ig N-terminal de type V et plusieurs domaines Ig de type C2.
• Sur le plan subcellulaire, il s'agit d'une protéine transmembranaire composée d'un peptide signal, d'une région extracellulaire, d'une hélice transmembranaire et d'une queue cytoplasmique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent des ponts disulfure et une glycosylation liée à l'azote, caractéristiques des récepteurs de surface cellulaire.
• Spécificité tissulaire : exprimé par les cellules de la lignée monocytaire/myéloïde, avec des niveaux élevés dans les leucocytes du sang périphérique, la rate et la moelle osseuse, et des niveaux plus faibles dans les ganglions lymphatiques, les poumons, l'appendice, le placenta, le pancréas et le thymus. Il est présent sur les monocytes et les neutrophiles, mais absent des lignées cellulaires leucémiques à un stade précoce.
• La protéine mature a un poids moléculaire prédit d'environ 61 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est directement conjugué à la PE, ce qui permet une utilisation immédiate en cytométrie en flux sans étape de détection secondaire. Veillez à utiliser des contrôles de compensation appropriés lors de l'emploi de plusieurs fluorophores.
• L'immunogène correspond à la région extracellulaire (acides aminés 17-434) et cible le domaine de liaison à l'acide sialique. Cette région devrait être accessible sur des cellules vivantes non perméabilisées.
• Pour la cytométrie en flux, validez la coloration sur des monocytes ou des neutrophiles du sang périphérique humain, qui expriment naturellement CD170/Siglec-5. Envisagez d'utiliser une lignée cellulaire myéloïde comme contrôle positif.
• Comme les interactions en cis avec les acides sialiques de la surface cellulaire peuvent masquer l'épitope, envisagez de traiter les cellules avec une sialidase avant la coloration afin de démasquer CD170/Siglec-5, en particulier si des signaux faibles sont observés.
• Utilisez un contrôle d'isotype de lapin conjugué à la PE approprié afin de distinguer la liaison spécifique du bruit de fond.
• L'anticorps est validé pour sa réactivité humaine ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été confirmée. Effectuez des tests sur des échantillons provenant de l'espèce souhaitée en cas d'utilisation au-delà de l'humain.

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