Anticorps monoclonal de lapin anti-humain CD158a/KIR2DL1 conjugué au PE pour la cytométrie en flux - P43626

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD158a/KIR2DL1

• KIR2DL1, également connu sous le nom de CD158a, NKAT1 ou p58.1, est un récepteur de type immunoglobuline des cellules tueuses (KIR) appartenant à la superfamille des immunoglobulines, caractérisé par des domaines immunoglobulines extracellulaires et une hélice transmembranaire.
• Il fonctionne comme un récepteur inhibiteur sur les cellules tueuses naturelles (NK), reconnaissant spécifiquement certains allèles HLA-C (par exemple, w4 et w6), et supprime la cytotoxicité médiée par les cellules NK pour empêcher la lyse des cellules cibles.
• Le récepteur est une glycoprotéine transmembranaire avec des domaines immunoglobulines stabilisés par des ponts disulfures, un peptide signal et une queue cytoplasmique qui transmet des signaux inhibiteurs.
• KIR2DL1 est principalement exprimé à la surface des cellules NK, jouant un rôle crucial dans la surveillance immunitaire et la tolérance au soi en surveillant l'expression des molécules du CMH de classe I.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes du récepteur, et les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfures, essentielles pour un repliement et une fonction appropriés.
• Au niveau subcellulaire, KIR2DL1 se localise à la membrane cellulaire, où sa région extracellulaire interagit avec les ligands sur les cellules cibles, tandis que son domaine intracellulaire recrute des phosphatases pour inhiber les signaux d'activation.
• La structure tridimensionnelle de KIR2DL1, résolue par cristallographie, révèle les interfaces clés de liaison aux ligands et les changements conformationnels lors de l'interaction avec HLA-C.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et vos conditions expérimentales, car l'intensité de marquage peut varier selon les sous-populations de cellules NK.
• Étant donné que l'immunogène englobe le domaine extracellulaire (acides aminés 22–245), cet anticorps convient au marquage de surface de cellules vivantes non fixées sans nécessiter de perméabilisation.
• Validez l'anticorps sur des lignées de cellules NK bien caractérisées ou sur des cellules NK humaines primaires pour confirmer sa spécificité, car l'expression de KIR2DL1 est distribuée de manière clonale et dépend de l'activation.
• Utilisez des témoins isotypiques appropriés et, si vous analysez plusieurs membres de la famille des KIR, envisagez des panels multicolores avec des fluorochromes soigneusement sélectionnés pour minimiser les artefacts de compensation.
• Lorsqu'il est utilisé dans des tests fonctionnels, notez que la liaison de l'anticorps peut bloquer la reconnaissance du ligand ou mimer l'engagement du récepteur ; testez au préalable dans votre système pour évaluer les effets agonistes/antagonistes potentiels.

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