Anticorps monoclonal de lapin anti-calréticuline humaine conjugué à la PE pour la cytométrie en flux intracellulaire - P27797

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la calréticuline

• La calréticuline (CALR, également connue sous les noms de CRP55, Calregulin, ERp60, HACBP et grp60) est une chaperonne de liaison au calcium hautement conservée, principalement localisée dans la lumière du réticulum endoplasmique (RE).
• Elle constitue un composant central du cycle calréticuline/calnexine, favorisant le repliement, l’assemblage oligomérique et le contrôle qualité des glycoprotéines nouvellement synthétisées en se liant aux glycanes N-liés monoglucosylés (PubMed:7876246). Références associées : PMID:7876246
• La calréticuline interagit avec le domaine de liaison à l’ADN du récepteur des glucocorticoïdes (NR3C1) et en assure l’exportation nucléaire, reliant ainsi la fonction du RE aux voies de signalisation cytoplasmiques (PubMed:11149926). Références associées : PMID:11149926
• Au-delà du RE, la calréticuline se localise dans le cytosol, à la surface cellulaire, dans la matrice extracellulaire et dans les vésicules de sécrétion ; elle est également détectée dans le réticulum sarcoplasmique, les granules corticaux et les granules cytolytiques, ce qui reflète la diversité de ses fonctions.
• Elle participe à l’homéostasie du calcium, à l’adhésion cellulaire et à la régulation de l’expression génique, et a été impliquée dans la maturation des ovocytes ainsi que dans le blocage de la polyspermie.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, l’hydroxylation et un pont disulfure conservé ; la protéine a un poids moléculaire d’environ 48 kDa et contient un peptide signal, des domaines de liaison aux lectines et des sites de liaison aux métaux.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région C-terminale (acides aminés 335–417) de la calréticuline humaine ; vérifiez que cet épitope est accessible dans votre protocole spécifique de fixation et de perméabilisation pour la cytométrie en flux intracellulaire.
• Comme cet anticorps est conjugué à la PE et recommandé pour le marquage intracellulaire, envisagez d’optimiser les conditions de perméabilisation et d’inclure des contrôles isot17ypes appropriés afin de tenir compte d’un éventuel bruit de fond dû aux récepteurs Fc intracellulaires ou à une liaison non spécifique.
• La calréticuline est exprimée dans plusieurs compartiments subcellulaires ; validez la spécificité du marquage en comparant les profils de localisation dans le RE, le cytosol ou à la surface cellulaire, selon votre contexte expérimental.
• Pour les applications autres que la cytométrie en flux intracellulaire, des essais préliminaires sont vivement recommandés, car cet anticorps n’a été validé que pour l’application indiquée dans les conditions du fournisseur.

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