Anticorps monoclonal de souris PE anti-CD3 humain pour cytométrie en flux - P07766

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD3E

• CD3E code la chaîne epsilon de la glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD3, qui forme le complexe TCR-CD3 sur les lymphocytes T et joue un rôle essentiel dans la réponse immunitaire adaptative. Références associées : PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Lors de l’engagement du TCR, la chaîne epsilon de CD3 transmet les signaux d’activation à travers la membrane cellulaire par l’intermédiaire de motifs d’activation à base de tyrosine des immunorécepteurs (ITAM), qui sont phosphorylés par les kinases de la famille Src LCK et FYN. Références associées : PMID:2470098 PMID:40592325
• Les ITAM phosphorylés servent de sites d’ancrage pour la kinase ZAP70, entraînant son activation et l’initiation de cascades de signalisation en aval essentielles à l’activation et au développement des lymphocytes T.
• CD3E régule l’expression en surface du complexe TCR-CD3 en assurant son internalisation et sa régulation négative par l’intermédiaire de séquences d’endocytose présentes dans sa région cytosolique. Références associées : PMID:10384095 PMID:26507128
• En outre, CD3E agit comme récepteur pour ITPRIPL1, qui inhibe l’activation des lymphocytes T en recrutant NCK1 et en bloquant l’interaction CD3E-ZAP70, supprimant ainsi la signalisation ERK-NFkB et l’afflux de calcium. Références associées : PMID:12110186 PMID:38614099
• La protéine contient un domaine de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et des ponts disulfure, ce qui correspond à son rôle de récepteur de la membrane cellulaire (mots-clés UniProt : pont disulfure, domaine d’immunoglobuline, transmembranaire).
• La localisation subcellulaire est principalement la membrane cellulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Comme cet anticorps est directement conjugué au PE, évitez les cycles de congélation-décongélation et conservez-le à l’abri de la lumière afin de préserver la stabilité du fluorophore.
• Effectuez un titrage de l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour la coloration en cytométrie en flux, en réduisant la liaison non spécifique et en maximisant le rapport signal/bruit.
• Incluez un contrôle d’isotype approprié ainsi que des contrôles de compensation lors de la conception de panels de cytométrie en flux multicolores comprenant le PE.
• CD3 est exprimé sur les lymphocytes T matures ; utilisez donc des PBMC, du sang total ou des lignées de lymphocytes T comme échantillons de contrôle positif.
• Validez la coloration dans le système biologique concerné et confirmez la spécificité de la cible à l’aide de contrôles par invalidation ou extinction génique lorsque cela est possible.

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