Anticorps monoclonal anti-MHC de classe II (I-A/I-E) de souris conjugué au PE pour la cytométrie en flux - P18468 / P06342 / Q3U060 / P14435

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du MHC de classe II (I-A/I-E)

• Les chaînes bêta I-A et I-E sont des composants centraux des molécules du complexe majeur d'histocompatibilité (MHC) de classe II de la souris, codées par des gènes tels que H2-Ab1 et H2-Eb1, respectivement. Ces protéines sont essentielles pour l'immunité adaptative en présentant des peptides antigéniques aux lymphocytes T auxiliaires CD4+.
• Chaque hétérodimère MHC de classe II est constitué d'une chaîne alpha et d'une chaîne bêta ; cet anticorps reconnaît les chaînes bêta des deux isotypes I-A et I-E, permettant une détection large de l'expression du MHC de classe II.
• Au niveau subcellulaire, les chaînes bêta du MHC de classe II sont des protéines membranaires de type I à passage unique qui circulent entre la membrane plasmique et les compartiments endosomiaux, où le chargement des peptides a lieu avant leur trafic vers la surface cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la formation de ponts disulfure dans le domaine extracellulaire, la glycosylation N-liée et l'ubiquitination, qui régulent la stabilité protéique et le renouvellement du MHC II.
• Les molécules sont classées dans la superfamille des immunoglobulines et possèdent une structure caractéristique : un peptide signal, deux domaines extracellulaires (α1/β1 et α2/β2), une hélice transmembranaire et une courte queue cytoplasmique.
• En tant que médiateurs centraux de la synapse immunitaire adaptative, les molécules MHC de classe II font le lien entre les systèmes inné et adaptatif, assurant une activation spécifique des lymphocytes T et une surveillance immunitaire.
• L'expression tissulaire est principalement observée sur les cellules présentatrices d'antigènes professionnelles (cellules dendritiques, macrophages, lymphocytes B) et les cellules épithéliales thymiques, mais peut être induite sur d'autres types cellulaires par des stimuli inflammatoires.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante englobant les séquences I-A/I-E ; pour une conception de réactif similaire, des constructions de domaine extracellulaire ou de pleine longueur peuvent aider à préserver la reconnaissance de la conformation native.
• Cet anticorps conjugué au PE est destiné à la cytométrie en flux. Titrer l'anticorps dans votre système cellulaire pertinent, et inclure un contrôle isotype approprié et une étape de blocage des récepteurs Fc pour minimiser le bruit de fond.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la souris ; une validation est recommandée si des échantillons d'autres espèces de rongeurs sont testés.
• Les poids moléculaires prédits des chaînes bêta cibles varient de 26 kDa à 32 kDa. Notez que l'anticorps n'a pas été validé pour le transfert Western dénaturant ; si tenté, une optimisation dans des conditions natives ou non réductrices peut être nécessaire.
• Comme l'anticorps reconnaît de multiples variants de chaînes bêta, il sert d'outil pan-MHC de classe II. Vérifier les profils d'expression dans la souche de souris ou la lignée cellulaire spécifique à utiliser.

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