Anticorps polyclonal de lapin anti-PDK4 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16654

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PDK4

• PDK4 est une kinase mitochondriale qui phosphoryle spécifiquement les sous-unités alpha E1 de la pyruvate déshydrogénase (PDHA1 et PDHA2), entraînant l’inactivation du complexe PDH.
• Par la régulation de la PDH, PDK4 contrôle le flux du pyruvate dans le cycle de l’acide tricarboxylique, réduisant ainsi la respiration aérobie et favorisant l’utilisation des acides gras au détriment de l’oxydation du glucose.
• PDK4 est essentielle à l’adaptation métabolique pendant le jeûne et la famine : elle contribue au maintien de l’homéostasie de la glycémie, prévient la formation excessive de corps cétoniques et préserve un pH sanguin normal dans des conditions de privation de nutriments.
• La protéine se localise dans la matrice mitochondriale grâce à un peptide de transit N-terminal et fonctionne comme une kinase nucléotidique fixant l’ATP.
• Bien qu’exprimée de manière ubiquitaire, PDK4 présente ses niveaux d’expression les plus élevés dans le cœur et les muscles squelettiques, ce qui reflète son importance dans les tissus à forte demande métabolique et à flexibilité énergétique.
• Au-delà du contrôle métabolique, PDK4 contribue à la production d’espèces réactives de l’oxygène, protège les cellules épithéliales détachées de l’anoïkis et influence la prolifération cellulaire en modulant le métabolisme des glucides et des lipides.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre une vaste région interne (aa 102–411) du PDK4 humain ; l’anticorps polyclonal obtenu peut reconnaître plusieurs épitopes, ce qui peut accroître la sensibilité, mais nécessite également des contrôles négatifs appropriés.
• Pour le western blot (WB), une bande principale d’environ 46 kDa est attendue ; validez la spécificité à l’aide de lysats provenant de tissus ou de cellules dont l’expression de PDK4 est connue (par exemple, le cœur ou les muscles squelettiques), ou au moyen d’une extinction par siRNA.
• En immunohistochimie (IHC-P), envisagez des méthodes de récupération antigénique et testez l’anticorps sur des coupes fixées au formol et incluses en paraffine provenant du cœur ou des muscles squelettiques ; une coloration mitochondriale devrait être observée.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC), confirmez la localisation mitochondriale par une co-coloration avec un marqueur mitochondrial ; les conditions de fixation et de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation.
• Une réactivité croisée est rapportée chez l’humain, la souris et le rat ; l’alignement des séquences suggère la conservation des épitopes, mais les utilisateurs doivent vérifier les performances dans leurs systèmes modèles spécifiques.

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