Anticorps polyclonal de lapin Pan-Akt pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749/P31751/Q9Y243

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Pan-Akt (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 est une serine/thréonine-protéine kinase appartenant à la famille des kinases AKT (comprenant AKT1, AKT2 et AKT3) qui régule le métabolisme, la prolifération, la survie cellulaire, la croissance et l'angiogenèse. Références associées : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Elle médie l'absorption du glucose induite par l'insuline via la translocation SLC2A4/GLUT4 et régule la synthèse du glycogène en inhibant GSK3A et GSK3B.
• AKT1 favorise la survie cellulaire par phosphorylation de MAP3K5/ASK1 au niveau de la 'Ser-83', inhibant l'apoptose induite par le stress oxydatif. Références associées : PMID:11154276
• Elle active la signalisation mTORC1 en phosphorylant TSC2, ce qui conduit à la synthèse protéique et à la croissance cellulaire. Références associées : PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 phosphoryle les facteurs de transcription FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4), ce qui entraîne une rétention cytoplasmique et inhibe leurs fonctions pro-apoptotiques. Références associées : PMID:10358075
• Elle régule positivement la transcription dépendante de NF-kappa-B et l'activité de CREB1, augmentant l'expression des gènes favorisant la survie (par exemple BCL2, MCL1). Références associées : PMID:9829964
• Au niveau sous-cellulaire, AKT1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, ce qui reflète ses rôles de signalisation variés.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la phosphorylation (activation), l'acétylation, la glycosylation et l'ubiquitination, comme souligné par les mots-clés UniProt.
• AKT1 est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, avec des niveaux élevés dans les cancers de la prostate et du sein, en particulier la forme phosphorylée Tyr-176 au cours de la progression du cancer du sein.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre une région conservée (aa 311-480) des AKT1, AKT2 et AKT3 humains, ce qui prédit une large réactivité Pan-Akt dans toute la famille AKT.
• Pour le western blot, attendez-vous à plusieurs bandes correspondant aux isoformes AKT : ~48 kDa (AKT1), ~55 kDa (AKT2) et ~51/54 kDa (AKT3). Validez la spécificité des bandes à l'aide de contrôles spécifiques des isoformes ou d'un knock-down par siRNA.
• Pour l'immunofluorescence / l'immunohistochimie, une fixation au méthanol ou au formaldéhyde est généralement adaptée ; cependant, une perméabilisation peut être nécessaire pour les cibles intracellulaires.
• En tant qu'anticorps polyclonal, prévoyez une variabilité entre lots pour le titre et l'affinité ; il est recommandé de titrer l'anticorps pour chaque nouveau lot et chaque nouvelle application.
• En immunoprécipitation, utilisez des billes de protéine A/G pour une capture optimale des IgG de lapin.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un tampon de revêtement et un système de détection optimisés ; testez plusieurs concentrations pour maximiser le rapport signal/bruit.

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