Anticorps polyclonal de lapin anti-PAK1 pour WB et ELISA - Q13153

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PAK1

• PAK1 (kinase 1 activée par p21), également connue sous le nom d'alpha-PAK ou p65-PAK, est une sérine/thréonine-protéine kinase codée par le gène PAK1 sur le chromosome 11. L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• PAK1 joue un rôle central dans la dynamique du cytosquelette, l'adhésion cellulaire, la migration, la prolifération, l'apoptose et la mitose en intégrant les signaux des intégrines et des récepteurs à tyrosine kinase (PubMed:10551809, PubMed:11896197, PubMed:12876277). Références associées : PMID:10551809, PMID:11896197, PMID:12876277
• Activée par les GTPases CDC42 et RAC1, PAK1 relie ces GTPases de la famille Rho à la voie de la kinase MAP JNK, et phosphoryle également MAP2K1 pour déclencher les cascades MAPK en aval (PubMed:8805275, PubMed:9528787). Références associées : PMID:8805275, PMID:9528787
• Dans le cytosquelette d'actine, PAK1 réorganise les fibres de stress et les complexes d'adhésion focale, et phosphoryle la chaîne légère de la myosine (MYL9/MLC2) pour réguler la contractilité de l'actomyosine (PubMed:9032240, PubMed:9395435). Références associées : PMID:9032240, PMID:9395435
• PAK1 protège contre l'apoptose en phosphorylant directement BAD, et phosphoryle également RAF1, favorisant sa translocation mitochondriale et la phosphorylation de BAD (PubMed:11733498). Références associées : PMID:11733498
• Au niveau subcellulaire, PAK1 se localise dans le cytoplasme, les adhésions focales, les lamellipodes, les membranes de ruffles, les invadopodes, le nucléoplasme et le centrosome, reflétant ses rôles divers.
• PAK1 est surexprimée dans les cellules et tissus du cancer gastrique, et contribue à la migration et à l'invasion des cellules cancéreuses via des voies médiées par RUFY3 (PubMed:25766321). Références associées : PMID:25766321
• Les fonctions supplémentaires incluent la régulation de la sécrétion d'insuline, le remodelage de la chromatine, la stabilité synaptique du récepteur GABA(A) et la formation des épines dendritiques, soulignant ses rôles pléiotropes (PubMed:22669945, PubMed:23260667). Références associées : PMID:22669945, PMID:23260667

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 130-250 de la PAK1 humaine, une région qui peut être conservée entre les espèces ; la réactivité croisée avec le rat est confirmée, mais les autres espèces doivent être validées individuellement.
• Pour le western blot (WB), une bande autour de 61 kDa est attendue ; cependant, l'épissage alternatif et les modifications post-traductionnelles peuvent produire plusieurs bandes. Envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires humaines ou de rat connues pour exprimer PAK1, telles que HeLa ou A431.
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps contre l'immunogène recombinant ou la protéine native dans une matrice appropriée ; les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement.
• En raison du rôle de PAK1 dans l'apoptose et la migration, surveillez les conditions de culture cellulaire (par exemple, privation de sérum, confluence) car elles peuvent influencer les niveaux d'expression.

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