PAK1 mAb de lapin pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13153

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PAK1

• Encodé par le gène PAK1, PAK1 (p21-activated kinase 1) est une sérine/thréonine-protéine kinase également appelée alpha-PAK, p65-PAK et PAKalpha. Elle appartient à la famille des kinases PAK qui agissent comme effecteurs des petites GTPases CDC42 et RAC1.
• PAK1 constitue un nœud de signalisation essentiel en aval des intégrines et des récepteurs tyrosine kinases, régulant divers processus cellulaires incluant la dynamique du cytosquelette, l'adhésion cellulaire, la migration, la prolifération, l'apoptose, la mitose et le transport vésiculaire (PubMed:10551809, PubMed:11896197, PubMed:12876277). Références associées : PMID:10551809 PMID:11896197 PMID:12876277
• Après activation par CDC42 et RAC1 liés au GTP, PAK1 relie les GTPases de la famille Rho à la voie de la MAP kinase JNK et phosphoryle des cibles en aval telles que MAP2K1, RAF1 et LIMK1, influençant ainsi l'expression génique et le remodelage de l'actine (PubMed:8805275, PubMed:9528787, PubMed:11733498, PubMed:23633677). Références associées : PMID:8805275 PMID:9528787 PMID:11733498 PMID:23633677
• PAK1 se localise dans de multiples compartiments sous-cellulaires, notamment le cytoplasme, les adhésions focales, les lamellipodes, les ondulations membranaires, les invadopodes, le nucléoplasme et les centrosomes, ce qui est cohérent avec ses rôles pléiotropiques dans la motilité cellulaire, l'adhésion et la signalisation nucléaire.
• La kinase joue un rôle dans la réorganisation du cytosquelette d'actine et des complexes d'adhésion focale, phosphorylant directement des régulateurs tels que la chaîne légère de myosine et la cofiline pour moduler la contractilité de l'actomyosine et la forme cellulaire (PubMed:9032240, PubMed:9395435). Références associées : PMID:9032240 PMID:9395435
• Chez les neurones, PAK1 est essentielle pour la formation des épines dendritiques, le développement des synapses excitatrices et la transmission inhibitrice GABAergique, en partie grâce à la stabilisation de l'actine F et la phosphorylation de la chaîne légère régulatrice de la myosine II.
• PAK1 est impliquée dans le cancer : elle est surexprimée dans les cellules et tissus cancéreux gastriques (PubMed:25766321), favorise la migration et l'invasion cellulaires, et phosphoryle des substrats impliqués dans le remodelage de la chromatine (MORC2, PubMed:23260667) et la transition épithélio-mésenchymateuse (SNAI1, PubMed:15833848). Références associées : PMID:25766321 PMID:23260667 PMID:15833848
• De plus, PAK1 participe à la sécrétion d'insuline (PubMed:22669945), à la réponse aux dommages de l'ADN et à la dynamique des granules de stress (PubMed:20417602). Références associées : PMID:22669945 PMID:20417602

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 100 de la PAK1 humaine, ce qui correspond à la région N-terminale. Cette région est probablement conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit de PAK1 est d'environ 61 kDa ; cependant, des modifications post-traductionnelles ou des variants d'épissage peuvent entraîner l'apparition de bandes supplémentaires. Utilisez des conditions réductrices appropriées et validez avec des contrôles positifs connus (par exemple, lysats de cellules HeLa ou MCF-7).
• En immunofluorescence (IF/ICC), PAK1 présente une distribution sous-cellulaire dynamique, apparaissant dans les adhésions focales, les ondulations membranaires et le noyau selon le type cellulaire et la stimulation. Une fixation au paraformaldéhyde et une perméabilisation au Triton X-100 ou au méthanol peuvent convenir, mais une optimisation est recommandée pour votre lignée cellulaire et vos conditions spécifiques.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans des formats directs ou indirects. Envisagez d'utiliser le peptide immunogène comme contrôle positif pour établir la sensibilité et la spécificité du test.
• Cet anticorps n'a pas été testé pour d'autres applications ; si vous l'utilisez pour IP, ChIP ou le blocage fonctionnel, une validation complète dans le système d'échantillons concerné est recommandée.

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