Anticorps monoclonal de lapin contre l'Orexine B pour WB, IHC, IF/ICC, ELISA - O43612

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Orexine B/Hypocrétine-2

• Le gène HCRT code pour le précurseur prépro-orexine, qui est traité par protéolyse pour produire deux neuropeptides matures : l'orexine-A (hypocrétine-1) et l'orexine-B (hypocrétine-2).
• L'orexine-B/hypocrétine-2 est un agoniste sélectif du récepteur de l'orexine HCRTR2/OX2R, tandis que l'orexine-A se lie à la fois à HCRTR1 et HCRTR2 avec une haute affinité.
• Les neurones à orexine projettent largement depuis l'hypothalamus latéral, et les peptides sont stockés dans des vésicules cytoplasmiques au niveau des terminaisons synaptiques ; au niveau sous-cellulaire, le précurseur se localise dans le réticulum endoplasmique rugueux.
• La signalisation centrale de l'orexine régule le comportement alimentaire, le métabolisme énergétique et les cycles veille-sommeil ; son dysfonctionnement est lié à des troubles du sommeil comme la narcolepsie (mot-clé UniProt : Variante pathologique).
• L'orexine-B module la sécrétion hypophysaire d'hormone lutéinisante d'une manière dépendante des stéroïdes ovariens (par similarité).
• Le précurseur subit des modifications post-traductionnelles incluant l'amidation, le clivage au niveau des résidus basiques appariés et la formation de ponts disulfures pour générer des peptides bioactifs.
• Il est abondamment exprimé dans le noyau sous-thalamique ; indétectable dans le cœur, le placenta, les poumons, le foie, le muscle squelettique, les reins et le pancréas (l'hypothalamus n'a pas été testé dans l'étude référencée).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante de l'Orexine B/Hypocrétine-2 humaine ; la spécificité de l'anticorps doit être validée dans le système d'échantillonnage concerné.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit du précurseur est de 13 kDa, mais les peptides matures sont plus petits ; pensez à optimiser les conditions de détection et à inclure des contrôles appropriés.
• Pour IHC-P, les méthodes d'extraction d'antigène peuvent nécessiter une optimisation empirique ; des tissus contrôles positifs comme le noyau sous-thalamique sont recommandés.
• Pour IF/ICC, les études de co-localisation avec des marqueurs synaptiques peuvent aider à confirmer la localisation ; la coloration de fond doit être évaluée avec des contrôles d'isotype.

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