AcM de lapin anti-NPY pour Western Blot, Immunofluorescence, Immunohistochimie, ELISA - P01303

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du NPY

• Le neuropeptide Y (NPY), également connu sous le nom de PYY4, est un peptide de 36 acides aminés de la famille des polypeptides pancréatiques, codé par le gène NPY (GeneID : 4852). C'est l'un des neuropeptides les plus abondants et les plus largement distribués dans le système nerveux des mammifères.
• Le NPY agit comme un ligand à haute affinité pour les récepteurs couplés aux protéines G NPY1R et NPY2R, déclenchant l'inhibition de l'adénylate cyclase et une augmentation des niveaux intracellulaires de Ca²⁺ (PubMed:1321422, PubMed:7592910, PubMed:35165283, PubMed:38882210). Références associées : PMID:1321422 PMID:7592910 PMID:35165283 PMID:38882210
• Par cette signalisation, le NPY stimule centralement la prise alimentaire et régule l'homéostasie énergétique, et module périphériquement la sécrétion ionique colique et la contractilité des muscles lisses.
• Le NPY est principalement localisé dans les vésicules sécrétrices, en particulier les grandes vésicules à cœur dense dans les neurones, et est libéré lors d'une stimulation pour agir comme un neuromodulateur et une hormone. On le trouve également dans les cellules chromaffines de la médullosurrénale.
• La préproprotéine NPY subit un clivage protéolytique au niveau de sites dibasiques et une amidation C-terminale pour générer le peptide mature biologiquement actif.
• Les mots-clés pour NPY incluent neuropeptide, amidation, clivage sur une paire de résidus basiques, phosphoprotéine, vésicule cytoplasmique et sécrété, reflétant ses voies de synthèse, de maturation et de libération.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique dérivé du NPY humain, donc l'anticorps reconnaît probablement un épitope linéaire. Il devrait bien fonctionner dans les applications dénaturantes comme le Western blot.
• Pour le WB, utilisez des lysats de cerveau, d'hypothalamus ou d'intestin. Le NPY est un petit peptide (env. 11 kDa) ; assurez-vous d'utiliser des gels à faible pourcentage ou des gels en gradient et des étalons protéiques appropriés. Envisagez d'ajouter des inhibiteurs de protéases pour prévenir la dégradation.
• Pour l'immunofluorescence (IF) et l'immunohistochimie (IHC), la récupération antigénique peut améliorer le signal. Les méthodes de fixation (par ex. PFA 4%) sont compatibles, mais validez-les dans votre tissu spécifique car le NPY est un peptide sécrété et rapidement dégradé.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection, mais l'appariement avec un autre anticorps anti-NPY pour un ELISA sandwich nécessite une optimisation empirique.

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